游离脂肪酸,别名非酯化脂肪酸,是脂肪水解产物,测定血清脂肪酸可以了解脂肪代谢的情况,升高代表脂肪分解增加。
游离脂肪酸能与铜离子结合形成脂肪酸的铜盐而溶于氯仿中,其含量与游离脂肪酸含量成正比。用铜试剂测定其中铜离子的含量,即可推算出游离脂肪酸的含量。
检测原理:
游离脂肪酸(Non-esterified fatty acids,NEFA)和辅酶 A 在乙酰辅酶 A 合成酶(ACS)的作用下反应生成乙酰辅酶 A。乙酰辅酶 A 在乙酰辅酶 A 氧化酶(ACOD)的作用下生成 H2O2,然后通过色原在过氧化物酶(POD)的作用下生成有色底物。
ACS
游离脂肪酸 + 辅酶A+ATP ---------------->乙酰辅酶A + AMP+PPi
ACOD
乙酰辅酶A+O2--------------> 2,3-反烯脂酰辅酶A+H2O2
POD
2H2O2+4-AAP+TOOS -------------->染料+4H2O2
染料的吸光度与样本中游离脂肪酸的浓度成正比。
用途:
用于血清、血浆、组织匀浆、细胞(或细胞上清)中游离脂肪酸(NEFA)的定量测定。
试剂组成:
试剂一:20ml×1 瓶.
试剂二:5ml×1 瓶.
1.00mmol/L 标准品:0.2ml×1 支
储存条件:
试剂 2~8°C避光保存,可稳定 6 个月。试剂不得冷冻,不可高温运输。试剂开封后,2~8°C避光保存可稳定 2 周。