检测原理:
以NAD+为氢受体,LDH催化乳酸脱氢产生丙酮酸,使NAD+转化成NADH。其中PMS递氢使NBT还原为紫色呈色物,呈色物的吸光度在530nm时与乳酸含量成线性关系。
产品优点如下:
1、快速简便:全程约30分钟,可测50例左右样本。
2、取样量微:本法取样量50ul-100ull即可
3、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
4、再现性好:变异系数CV=1.7%。
5、回收试验: X =99%。
6、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
试剂组成及配制(50 管/48 样):
蛋白沉淀剂:溶液 50ml×1 瓶,室温保存 6 个月,如有结晶,则取上清进行实验。
试剂一:酶稀释液 60ml×1 瓶, 4°C~8°C冰箱保存 6 个月。
试剂二:酶贮备液 0.6 ml×1 支, 4°C~8°C冰箱保存 6 个月;用时用一次性吸头进行取样。
酶工作液的配制:临用前将试剂二(酶贮备液)和试剂一(酶稀释液)按照 1︰100 的体积比进行混合,现用现配,4°C保存 24 小时内有效;
试剂三:显色溶液 6 ml×2 瓶, 4°C~8°C避光冰箱保存 6 个月。
试剂四:粉剂×2 支,短期内使用可放 4°C~8°C冰箱,长期(6 个月)存放请置-20°C以下。
显色剂的配制:使用前取试剂四粉剂 1 支倒入 1 瓶试剂三液体中,待粉剂全部溶解后,用微量移液器取少许液体打入小离心管中,反复颠倒离心管,再用微量
移液器将离心管中的液体转移到瓶中,如此反复 2~3 次,使二者充分混合,配成显色剂,4°C~8°C冰箱避光保存。
试剂五:终止液,60 ml×2 瓶, 4°C~8°C冰箱保存 6 个月。
试剂六:3mmol/L 标准液,2 ml×1 支, 4°C~8°C冰箱保存 6 个月。
所需仪器及自备试剂:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为530nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
储存条件:
本试剂盒保存期:6个月。贮存温度:2~8℃。特别提醒R4试剂需-20ºC以下冷冻保存。