1. 实验部分
1.1 实验仪器及耗材
Shimadzu LC-20ADXR 高效液相色谱仪;
色谱柱:Shim-pack Scepter C18(5 μm,4.6×250 mm;P/N:227-31020-06;S/N:129HA90024);
Shim-pack VP-ODS (5 μm,4.6×250mm;P/N:228-34937-92;S/N:9062692);
Shim-pack Scepter C18 (1.9 μm,2.1×100mm;P/N:227-31012-05;S/N:117HB00090);
SHIMSEN Arc Disc HPTFE针式过滤器(P/N:380-00341-05);
LC-MS认证样品瓶LabTotal Vial(P/N:227-34001-01);
SHIMSEN Pipet移液枪:SHIMSEN Pipet PMII-10(P/N:380-00751-02);
SHIMSEN Pipet PMII-100(P/N:380-00751-04);
SHIMSEN Pipet PMII-1000(P/N:380-00751-06)。
1.2 溶液的制备
1.2.1 系统适用性溶液
取地塞米松对照品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1 mL中约含0.5 mg的溶液,精密量取1 mL与供试品溶液1 mL,置同一100 mL量瓶中,用流动相稀释至刻度,摇匀。
1.2.2 供试品溶液
临用新制,取本品适量,精密称定,加流动相溶解并定量稀释制成每1 mL中约含0.5 mg的溶液。
1.2.3 对照溶液
供试品溶液稀释 100 倍。
1.2.4 灵敏度溶液
供试品溶液稀释 2000 倍。
1.3 HPLC分析条件和实验结果
1.3.1 HPLC分析条件和实验结果
分析条件
仪器:Shimadzu LC-20ADXR;
流动相:乙腈:水=40:60。
柱温:25 ℃
检测波长:240 nm
流速:1.5 mL/min
进样量:20 μL
实验结果
按照上述色谱条件(1.3.1)进行采集,色谱图如下:
1)色谱柱:Shim-pack Scepter C18(5 μm,4.6×250mm;P/N:227-31020-06;S/N:129HA90024);
系统适用性溶液:
供试品溶液:
对照溶液:
灵敏度溶液:
2)色谱柱:Shim-pack VP-ODS(5 μm,4.6×250mm;P/N:228-34937-92;S/N:9062692);
系统适用性溶液:
供试品溶液:
对照溶液:
灵敏度溶液:
1.3.2 UPLC分析条件和实验结果
分析条件
仪器:Shimadzu LC-2040C 3D;
色谱柱:Shim-pack Scepter C18(1.9 μm,2.1×100mm;P/N:227-31012-05;S/N:117HB00090);
流动相:乙腈:水=40:60。
柱温:35 ℃
检测波长:240 nm
流速:0.4 mL/min
进样量:2 μL
实验结果
按照上述色谱条件(1.3.2)进行采集,色谱图如下:
系统适用性溶液:
供试品溶液:
对照溶液:
灵敏度溶液:
2. 结论
本文建立了醋酸地塞米松有关物质分析的 HPLC 和 UPLC 测定方法。参照《中国药典》中色谱分析条件,采用色谱柱 Shim-pack Scepter C18、Shim-pack VP-ODS,对醋酸地塞米松有关物质系统适用性溶液、供试品溶液、对照溶液、灵敏度溶液进行分析,系统适用性色谱图中,出峰顺序依次为地塞米松与醋酸地塞米松,地塞米松峰与醋酸地塞米松峰之间的分离度大于 20.0,满足《中国药典》需求,此方法可为醋酸地塞米松有关物质分析提供参考。