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果胶含量检测试剂盒(微量法)
果胶含量检测试剂盒(微量法)图片
包装: 100管/48样
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产品介绍

果胶是一种植物胶体,分布于果蔬类植物中,存在于植物的细胞壁和细胞内层。果胶中含有半乳糖醛酸、乳糖、阿拉伯糖、葡萄糖醛酸等,主要成分是半乳糖醛酸,其独特的物理、化学性质影响着植物源食品的口感和品质。

采用咔唑比色法测定果胶含量。果胶水解成半乳糖醛酸,在硫酸溶液中与咔唑试剂缩合生成紫红色化合物,在530nm处有最大吸收峰。测定样品中半乳糖醛酸的含量,即可确定果胶的含量。

注意:实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

产品组成:

试剂名称规格保存条件
试剂一标准液1ml×1瓶2-8℃
试剂二液体5ml×1瓶2-8℃

试验中所需的仪器和试剂:

研钵、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、1ml玻璃比色皿、可调式移液枪、浓硫酸和蒸馏水。

操作步骤 (仅供参考) :

一、样品处理

将组织样品捣碎,按照样品质量(g)和蒸馏水体积(ml)为 1:5-10的比列(建议取约 0.1g样品,加入 1ml蒸馏水),充分匀浆,8000g、4℃离心 10min,取上清液待测。

二、分光光度计或酶标仪预热 30min以上,调节波长至 530nm处,蒸馏水调零,试剂一和试剂二 37℃预热 10min以上。

三、测定操作表(在 EP管中加入下列试剂)

试剂名称(μL)空白管标准管对照管测定管
待测样本

5050
试剂一
50

蒸馏水50
50
试剂二5050
50
混匀
浓硫酸400400400400
充分混匀,95℃水浴 5min后,冷却至室温,取 200μL置微量石英比色皿或 96孔板中,测定 530nm处吸光值,空白管、标准管、对照管和测定管吸光值分别记为 A1、A2、A3和 A4。若 A大于 1,需将待测样本用蒸馏水稀释(可稀释 10倍或 20倍)

注意:空白管和标准管只要做一管,每个测定管需设一个对照管。

四、计算公式

果胶含量(mg/mgprot)=(标准×V1)×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(V1×Cpr)×稀释倍数=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷Cpr×稀释倍数

果胶含量(mg/g鲜重)=(C标准×V1)×(A4-A3)÷(A2-A1)÷(W×V1÷V2)×稀释倍数=0.05×(A4-A3)÷(A2-A1)÷W×稀释倍数

C标准:标准管浓度,0.05mg/ml; V1:加入样本体积,0.05ml; V2:加入提取液体积,1ml; Cpr:样本蛋白质浓度,mg/ml; W:样本鲜重:g

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