检测原理:
苹果酸脱氢酶(Malate Dehydrogenase, MDH)催化的氧化还原反应伴随着340nm处吸光度的降低,通过测定每分钟吸光度的变化来计算苹果酸脱氢酶的活力。
产品优点如下:
快速简便:速率法操作全程约5分钟,可做5-10个样本
稳定性好:试剂盒-20℃冷冻保存6个月有效。
再现性好:变异系数CV=1.2%。
回收试验: X =104%。
受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
测试面广:可测动物组织、培养细胞、植物组织、各种水产等,效果均佳。
所需仪器及自备试剂:
1、紫外分光光度计(比色测定波长为340nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
动物组织样本:可用生理盐水按重量体积比制备成组织匀浆液,离心取上清测定。
培养细胞、植物组织:常用PBS作为匀浆介质破碎后离心取上清测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程:
1、按步骤加入1ml测定液漩涡混匀,37℃孵育3分钟
2、加入样本100μl, 20秒时340nm测出OD1
3、1分20秒时340nm测出OD2