胆碱脂酶主要在肝细胞中产生,主要用于估计肝脏的储备能力和肝脏疾病的预后。肝脏疾病时活力常降低,降低程度往往与病情严重程度有关。肝硬化代偿期活力明显下降,在肝性脑病时最为显著,但在阻塞性黄疸时无改变。阿米巴肝脓肿此酶下降明显,治疗后在短期内迅速恢复正常,帮对阿米巴肝病研究有一定帮助。在一些肝外疾患,如全身营养不良,重度贫血、癌症、晚期血吸虫病、败血病、重症结核病(尤其是肾结核或浆膜结核)等均可中度或重度降低,此酶增高见于肾病综合症、甲状腺机能亢进、糖尿病、高血压、高血脂。
检测原理:
血液及组织中CHE使乙酰胆碱水解成胆碱和乙酸,未被分解的剩余乙酰胆碱与羟胺作用生成乙酰羟胺,再与铁离子在酸性溶液中形成棕色复合物,根据颜色深浅推算出酶的活力。
产品优点如下:
1、快速简便:全程约30分钟,可测50例左右样本。
2、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
3、再现性好:变异系数CV=1.2%。
4、回收试验: X =102%。
5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
6、测试面广:可测动物血清(浆)、组织,效果均佳。
试剂组成与配制:(50 管/48 样)
试剂一:溶液 60ml×1 瓶,室温保存 6 个月。
试剂二:乙酰胆碱粉剂×1 支,-20°C保存 6 个月,稀释液 5ml×1 瓶,4ºC 保存 6 个月。
80mol/ml乙酰胆碱底物贮备液的配制:将1支乙酰胆碱粉剂倒入 5ml 稀释液中溶解,4ºC保存。
8mol/ml乙酰胆碱应用液的配制:按贮备液︰试剂一 = 1︰9 的比例进行稀释,现用现配,用多少配多少。
试剂三:甲粉×1 支;乙液 30 ml×1 瓶;丙液 30 ml×1 瓶;室温保存 6 个月。
试剂三应用液的配制:每次测试前将甲粉倒入乙液中,充分摇匀,根据需要量将甲乙混合液与丙液等量混合,充分混匀,配成试剂三应用液,现用现配。
试剂四:溶液 30 ml×1 瓶,室温保存 6 个月。
试剂五:溶液 20 ml×1 瓶,室温保存 6 个月。
试剂六:粉剂×1 瓶,稀释液 30ml×1 瓶, 4°C避光保存 6 个月。测试前将稀释液倒入粉剂中,充分混匀溶解后备用。
所需仪器及自备试剂:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为520nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、漩涡混匀器
4、微量移液器
5、台式离心机