在 rCutSmart™ 缓冲液中具有 100% 活性(超过 210 种内切酶兼容于此缓冲液),便于进行双酶切
AleI-v2 是 AleI 经基因工程改造的优化版本。(NEB 在名称中使用“v2”或“HF”来表示经基因工程改造的酶。)
产品来源
大肠杆菌菌株,携带有克隆自液化金杆菌(Aureobacterium liquefaciens)(S.K. Degtyarev)并经修饰的 AleI 基因。
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 µl 的总反应体系中,37℃ 条件下,1 小时内酶切 1 µg λ DNA 所需的酶量。
反应条件
1X rCutSmart™ 缓冲液
Incubate at 37℃
1X rCutSmart™ 缓冲液
50 mM Potassium Acetate
20 mM Tris-acetate
10 mM Magnesium Acetate
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: <10%
NEBuffer™ r2.1: <10%
NEBuffer™ r3.1: <10%
rCutSmart™ Buffer: 100%稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
200 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
200 µg/ml Recombinant Albumin
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃
热失活
65℃ for 20 minutes
甲基化敏感性
dam 甲基化: 不敏感
dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 甲基化与酶切位点重叠影响酶切
同裂酶
OliI
- 注意事项
- AleI-v2 是 OliI 的完全同裂酶。
- CpG 甲基化影响酶切。登陆“Dam-Dcm 和 CpG 甲基化”查看更多信息。
- AleI-v2 与 AleI(NEB #R0634)特异性相同,但 AleI-v2 已经过改造,可在 -20℃ 下有更高的稳定性。