- 符合省时酶(Time-Saver™)标准,可在 5-15 分钟内完成酶切
- 随附 1 管 6X 紫色凝胶上样染料
- 限制性内切酶酶切位点:G/CWGC
产品来源
大肠杆菌菌株,携带有超嗜热需氧古生菌(
Aeropyrum pernix)K1(ATCC 700893)的 ApeKI 基因。
- 特性和用法
单位定义
一个单位是指在 50 μl 的总反应体系中,75℃ 下,1 小时内酶切 1 μg λ DNA 所需的酶量。
反应条件
1X NEBuffer™ r3.1
Incubate at75℃
1X NEBuffer™ r3.1
100 mM NaCl
50 mM Tris-HCl
10 mM MgCl2
100 µg/ml Recombinant Albumin
(pH 7.9 @ 25℃)
在不同缓冲液中的活性
NEBuffer™ r1.1: 25%
NEBuffer™ r2.1: 50%
NEBuffer™ r3.1: 100%
rCutSmart™ Buffer: 10%稀释兼容性
贮存溶液
10 mM Tris-HCl
300 mM NaCl
1 mM DTT
0.1 mM EDTA
500 µg/ml Recombinant Albumin
50% Glycerol
pH 7.4 @ 25℃
热失活
否
甲基化敏感性
dam 甲基化: 不敏感
dcm 甲基化: 不敏感
CpG甲基化: 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切
同裂酶
TseI
在不同温度下的活性
@37℃: 10% - 注意事项
- ApeKI 是 TseI 的同裂酶。
- ApeKI 是一种高热稳定性限制性内切酶,在温度高达 95℃ 时仍有活性。95℃ 条件下,ApeKI 的半衰期为 20 分钟。
- 对于不能热失活的酶,我们建议进行柱纯化(如 Monarch® PCR & DNA 纯化试剂盒),或琼脂糖凝胶电泳后切胶回收(建议使用 Monarch DNA 胶回收试剂盒),或酚/氯仿抽提。
- CpG 甲基化与酶切位点重叠阻断酶切。