产品名称：超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒-WST-8法说明书
产品货号：GOY-016321
检测方法：可见分光光度法 微板法 可见分光光度法 微板法 
产品规格：48样 96样 96样 196样 
产品分类：氧化应激系列
自备仪器和用品：

分光光度计、离心机、移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

测定步骤：

1、 分光光度计预热30min以上，调节波长至450nm，蒸馏水调零。

2、 试剂三的稀释：将试剂三用蒸馏水稀释50倍，用多少配多少。（试剂三和蒸馏水1：49稀释。

3、 工作液配制：在试剂一加入250μl试剂二，充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。（若一次性测定样本较少，可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml：0.1ml的比例混匀配制）

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解（溶解后一周内用完）。

5、 样本测定充分混匀，室温静置30min后，450nm处测定各管吸光值A。

注意事项

1、试剂三为酶，不可冷冻，使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、SOD为什么有的样本测定管大于对照管，对照管数值在什么范围？

对照管的范围是0.4-1。对照管吸光值过低可能是（1）试剂三活性低，可以适当减少稀释倍数；（2)没有按顺序加试剂；（3）反应时间不够，可以延长反应时间（反应时间30min可以延长到40min）。对照管吸光值过高可能是试剂三未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管，可能是样本中杂质的影响太大，为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测，通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。

NADP-苹果酸脱氢酶（NADP-MDH）测试盒    紫外分光光度法、微量法    50管/48样、 100管/96样    

线粒体呼吸链复合体Ⅰ活性测试盒       紫外分光光度法、微量法    25管/24样、 100管/96样    

NADH氧化酶（NOX）测试盒      可见分光光度法、微量法    50管/48样、 100管/96样    

柠檬酸合酶(CS）测试盒    可见分光光度法、微量法    50管/48样、 100管/96样    

丙酮酸脱羧酶（PDC）测试盒    紫外分光光度法、微量法     50管/48样、 100管/96样    

醇脱氢酶（ADH）测试盒    紫外分光光度法、     50管/48样、    

单脱氢抗坏血酸还原酶（MDHAR）测试盒    紫外分光光度法、微量法    50管/48样、 100管/96样    

乙醛脱氢酶（ALDH）测试盒    紫外分光光度法、微量法    50管/48样、100管/96样    

辅酶ⅡNADP(H)含量测试盒    可见分光光度法、微量法    50管/24样、100管/48样    

NADP磷酸酶（NADPase）测试盒    可见分光光度法、微量法    50管/48样、 100管/96样    

6-磷酸葡萄糖脱氢酶（G6PDH）测试盒    紫外分光光度法、微量法    50管/48样、 100管/96样    

胞浆异柠檬酸脱氢酶（ICDHc）测试盒    紫外分光光度法、微量法    50管/48样、 100管/96样    

NADP苹果酸酶（NADP-ME）测试盒    紫外分光光度法、微量法    50管/48样、 100管/96样    

NAD-苹果酸酶（NAD-ME）测试盒    紫外分光光度法、微量法    50管/48样、 100管/96样    

6-磷酸葡糖糖酸脱氢酶（6PGDH）测试盒    紫外分光光度法、微量法    50管/48样、 100管/96样    

肌酸激酶测试盒    紫外分光光度法、微量法    50管/48样、 100管/96样    

脂肪酸合成酶（FAS）测试盒    紫外分光光度法、微量法    10管/9样、 100管/96样    

蔗糖磷酸化酶(SP)测试盒    紫外分光光度法、微量法    50管/48样、 100管/96样    

Anti-ZNF474/ZFP106    锌指蛋白474抗体    0.1ml/100μg 0.2ml/200μg    

Anti-ZNF307    锌指蛋白307抗体    0.2ml/200μg    

Anti-ZAP70    zeta相关蛋白70抗体    0.1ml/100μg 0.2ml/200μg    

Anti-ZBED4    锌指蛋白BED4抗体    0.2ml/200μg    

Anti-ZW10 peptide    着丝粒蛋白抗体    0.1ml/100μg 0.2ml/200μg    

Anti-ZBTB39    锌指蛋白ZBTB39抗体    0.2ml/200μg    

Anti-ZNF231    锌指蛋白231抗体    0.2ml/200μg    

Anti-ZBTB3    锌指蛋白ZBTB3抗体    0.2ml/200μg    

Anti-ZNF434    宫颈癌抑癌蛋白5/锌指蛋白434抗体    0.2ml/200μg    

Anti-ZNF217    锌指脂蛋白217抗体    0.2ml/200μg    

超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒-WST-8法说明书Anti-ZBTB42/ZNF925    锌指蛋白925抗体    0.2ml/200μg    

Anti-ZAR1L    受精卵抑制蛋白1样蛋白抗体    0.2ml/200μg    

Anti-ZBT10    锌指蛋白ZBT10抗体    0.2ml/200μg    

Anti-ZBED2    锌指蛋白BED抗体    0.2ml/200μg    

使用说明：

样品的准备：

细胞样品的准备：对于贴壁细胞，吸净细胞培养液，用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍，按照每100万细胞加入100～200μL的比例加入本试剂盒提供的SOD样品制备液，适当吹打以充分裂解细胞；对于悬浮细胞，600g离心5分钟收集细胞，用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍，按照每100万细胞加入100～200μL的比例加入SOD样品制备液，适当吹打，以充分裂解细胞。4℃约12000g离心3～5分钟，取上清作为待测样品。

组织样品的准备：动物用生理盐水(0.9% NaCl，含有0.16mg/ml肝素钠)灌流清除血液后获取组织样品。取适量的组织样品，按照每10mg组织加入100μL SOD样品制备液的比例在4℃或冰浴进行匀浆(可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器)。4℃约12000g离心3～5分钟，取上清作为待测样品。

血浆或红细胞样品的准备：用抗凝管收集血液，颠倒混匀。4℃ 600g离心10分钟，移取上清至另一新的1mL离心管中，适量生理盐水稀释后即可作为血浆样本进行检测。红细胞样品可以参考步骤1a悬浮细胞样品的制备方法，或其它不含Triton X-100等去垢剂的样品制备方法。

上述样品准备完毕后可以用百奥莱博生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。通常10～20μg蛋白的细胞或组织匀浆液样品中的SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大，该活力范围仅作为初步的参考)。每种样品准备20～100μg蛋白量通常已经足够用于后续检测。

根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量，用本试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如，小鼠肝脏组织10%匀浆液(组织和匀浆液的重量比为1:10)上清，通常需要稀释10～100倍。准备好的样品如果当天测定，可以冰浴保存；如果当天不能完成测定，可以-70℃冻存，但建议尽量当天完成测定。