分光光度计的基本工作原理是基于物质对光(对光的波长)的吸收具有选择性，不同的物质都有各自的吸收光带，所以，当光色散后的光谱通过某一溶液时，其中某些波长的光线就会被溶液吸收。在一定的波长下，溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有一定的比例关系，即符合比尔定律。

分光光度计种类繁多，但不外乎简易型、中档型和型三大类。我们在选用分光光度计时需要考虑以下几个方面：

1、波长检测范围，波长选择方式

越的仪器波长检测范围越宽，当然价格也较高，用户需要根据自己的需求选择合适的波长范围；对于简单型的仪器，波长选择方式一般是手动查找，这种方式的重复性较差，型的仪器中波长可以按照设定模式自动查找或扫描，其次型的波长扫描速度的档位也会增加。

2、光束

光束类型分为单光束型，双光束型或准双光束型。单光束一般适于在给定波长处测量吸光度，不能作全波段光谱扫描，并且要求光源和检测器具有很高的稳定性；双光束可以自动记录，快速全波段扫描。可消除光源不稳定、检测器灵敏度变化等因素的影响，特别适合于结构分析；假双光束也就是比例双光束，优点是可以监测光源变化带来的误差，它的原理是由同一单色器发出的光被分成两束，一束直接到达检测器，另一束通过样品后到达另一个检测器。但是这种方式并不能消除参比造成的影响。

3、光源

可见光区主要用钨灯，卤钨(320～2500nm)；紫外区主要用氢灯，氘灯(180～375nm)；氙灯在紫外和可见光区均可用作光源。

4、样品支架

简单的样品支架为推拉式四联池架，一次只能测量一个样品，参比和样品分两次测量；型的样品池支架为两个固定式，分别是样品通道和参比通道，可以同时测量参比和样品的吸光值。

5、狭缝

简易型的狭缝一般是固定宽度模式，狭缝宽度多数为2nm，也有1.5nm的；型的仪器狭缝均为连续可调型，可以适应高分辨率的需要。

6、光学性能指标

光学性能的高低直接影响到测量的准确性，其中光栅的技术指标尤为重要。型仪器的光栅质量较好，一般较佳的光栅为凹面型，并且大尺寸的凹面光栅对应的刻槽数越多，因此在分辨率和杂散光方面指标要优于简易型仪器。

7、检测器

检测器是利用光电效应，将透过溶液的光信号转换为电信号，并将电信号放大的装置。简易型仪器一般采用光敏二极管；中档型仪器采用硅光二极管；型仪器的检测器使用高灵敏度的光电倍增管和红外检测器。

8、显示器

简易型仪器多为机械表头或数码管显示器，没有数据处理器；型仪器的显示器为液晶式或连接电脑，数据处理可由仪器自身具有的或外接计算机处理。

9、测量模式

简易型仪器多为定点(固定波长)吸光度或透过率测量方式，基本不能进行波长扫描测量；型仪器的测量模式较多，可以显示透过率、吸光度、浓度直接读数、单光束，单点及扫描均可。

10、测量附件

衡量仪器质量高低的重要方面是看仪器是否具有丰富的附属测量器件，如偏振附件、积分球附件、反射附件、自动进样器附件、色度分析软件、薄膜附件。

11、测量样品的状态

可见和紫外的分光光度计一般测量液态样品，红外分光光度计一般能分析各种状态(气、液、固)的试样。