产品编号:HCM0625 / HCM0650A / HCM0615 / HCM0650B
一、 用途
免疫亲和柱可选择性吸附样品液中的脱氧雪腐镰刀菌烯醇(呕吐毒素,DON),从而对样品起到非常针对性的净化作用,过柱净化后的样品液可直接用于HPLC分析。
亲和柱与HPLC配合使用可达到快速测定的目的,以改善信噪比,可提高检测方法的准确度。
二、 概述
脱氧雪腐镰刀菌烯醇(deoxynivalenol)又称呕吐毒素(Vomitoxin)属于霉菌的单端孢菌素族,由某些镰刀霉真菌属产生。呕吐毒素多分布于小麦、大麦、玉米等谷物籽实中,含量通常是mg/kg级的,因为他们具有高的细胞毒性及免疫抑制性,所以对人类及动物构成了健康威胁。
三、 原理
测定的基础是抗原、抗体反应,抗体连接在柱体内,样品经过提取、过滤后,缓慢的通过脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫亲和柱,在免疫亲和柱内毒素与抗体结合,之后洗涤免疫亲和柱除去没有被结合的其他无关物质。用甲醇洗脱脱氧雪腐镰刀菌烯醇,然后注入到分析仪器中用于检测。
四、 包装组成
每一个盒中包括各种规格脱氧雪腐镰刀菌烯醇免疫亲和柱及1份说明书。
五、 注意事项
----使用前,免疫亲和柱需回至室温(22~25℃)。
----亲和柱2~8℃储存,不得冻存。
----不要使用过了有效日期的免疫亲和柱。
----取样量:根据需要可以适当增加或减少取样量,注意提取液量要相应改变。
----pH:亲和柱的上样溶液pH需在6~8之间,若偏离此范围需要用盐酸或氢氧化钠调节pH。
----由于样本中呕吐毒素的含量普遍较高,如果计算后样本含量大于4mg/kg时,表示已经超过亲和柱柱容量,需要适当降低上样液的体积,重新检测。
----上机检测时的溶剂与流动相保持一致可以消除溶剂效应的影响。
----呕吐毒素可致癌,应戴手套操作。
----使用过的容器及标准品溶液最好用次氯酸钠溶液(5%V/V)浸泡过夜。
六、 样品处理
方法一:粮食及饲料
A.玉米、小麦、面粉、配合饲料、浓缩料、精补料等吸水性较小的样本
称取粉碎样品,聚乙二醇8000,加入蒸馏水;高速均质;用快速定性滤纸过滤,收集滤液;再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;取上样液过免疫亲和柱净化。
稀释倍数:2
B. 麸皮、豆皮、玉米胚芽粕、米糠等吸水性较强的样本
称取样品,聚乙二醇8000,加入蒸馏水;高速均质;用快速定性滤纸过滤,收集滤液;再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;取上样液过免疫亲和柱净化。
稀释倍数:2
方法二:酒类
取脱气的酒类样品加入聚乙二醇8000,用PBS缓冲液定容;高速均质;用快速定性滤纸过滤,收集滤液;再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;取上样液过免疫亲和柱净化。
稀释倍数:2
方法三:酱油、醋、酱及酱制品
取样品,加入聚乙二醇8000,用PBS缓冲液定容;高速均质;用快速定性滤纸过滤,收集滤液;再用微纤维滤纸过滤,并收集滤液作为上样液;取上样液过免疫亲和柱净化。
稀释倍数:2
七、 操作程序
上样、洗涤、洗脱
* 每次上样前都要将上次液体完全排干。
八、 结果判读
脱氧雪腐镰刀菌烯醇的含量=检测浓度×稀释倍数
九、 贮藏条件及保存期
贮藏条件:2~8℃;
保存期:该产品有效期为12个月。