种属：人

性别：男

组织来源：包皮

生长特性：贴壁生长

形态特征：成纤维细胞样

微生物，支原体检测：阴性

培养条件：

完全培养基：DMEM(内含2mM L-glutamine)+10%新生牛血清(NCS).

血清我们推荐用:

GIBCO-NCS-16010用质量不好的血清不能保证此细胞会有好的生长状态,并且传代数不会很高.

培养条件：37.0C, CO2:5%

传代方法：

收到细胞后，在倒置显微镜下观察整个细胞生长情况：

如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，换 10ml新鲜培养液后继续培养。

如果细胞已长满(达80-90%)，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用不含钙、镁离子的PBS洗1-2次。

2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中，倒转放于37℃培养箱1-3分钟预热，然后将培养瓶翻过来让胰酶与细胞面接触大约10-30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量完全培养基终止消化。

3. 按6-8ml/瓶(625px2)补加完全培养基，轻轻打匀后吸出一半，分到新的培养瓶中。如果没有特别说明，收到细胞后的**次传代一般是一传二。

注：1、观察细胞**在低倍镜(4或5X物镜)下进行，否则不能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X或20X物镜下。

2、瓶中运输培养基不能重复再用,请换用加双抗的新培养基，细胞冻存后,培养基中可不加任何抗生素。

3、有些细胞贴壁不牢，如发现贴壁细胞有脱落，可离心吹打后接种到新瓶内。

4、收到细胞后，若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染，请及时与我们联系。

冻存方法：

冻存液：90%完全培养液，10%DMSO(细胞培养级)，现用现配。

储存：液氮。