| CAS NO: | 938440-64-3 |
| 包装 | 价格(元) |
| 10mM (in 1mL DMSO) | 电议 |
| 5mg | 电议 |
| 25mg | 电议 |
| 100mg | 电议 |
| Physical Appearance | A solid |
| Storage | Store at -20°C |
| M.Wt | 465.54 |
| Cas No. | 938440-64-3 |
| Formula | C25H31N5O4 |
| Solubility | insoluble in H2O; insoluble in EtOH; ≥11.65 mg/mL in DMSO |
| Chemical Name | [5-[2-[(2R,6S)-2,6-dimethylmorpholin-4-yl]-4-morpholin-4-ylpyrido[2,3-d]pyrimidin-7-yl]-2-methoxyphenyl]methanol |
| Canonical SMILES | CC1CN(CC(O1)C)C2=NC3=C(C=CC(=N3)C4=CC(=C(C=C4)OC)CO)C(=N2)N5CCOCC5 |
| 运输条件 | 蓝冰运输或根据您的需求运输。 |
| 一般建议 | 为了使其更好的溶解，请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存，请尽快用完。 |
Ku-0063794是一种特异性的mTOR抑制剂，对mTORC1和mTORC2抑制的IC50值大约为10 nM[1]。
mTOR（哺乳动物雷帕霉素靶蛋白）蛋白激酶位于信号通路的关键位置，调节细胞生长和增殖。各种癌驱动基因突变，如受体酪氨酸激酶、RAS、PI3K（磷酸肌醇3-激酶）和PTEN，通过活化mTOR激酶诱导增殖、生长和存活。mTOR通过磷酸化和促进AGC家族激酶的激活促进细胞生长，AGC是蛋白激酶A 、蛋白激酶G和蛋白激酶C等的统称，主要有Akt（蛋白激酶B）、S6K（P70核糖体S6激酶）和SGK（血清和糖皮质激素蛋白激酶）。mTORC1磷酸化S6K的疏水残基，而mTORC2磷酸化Akt和SGK的疏水残基。Ku-0063794在体外和体内同时抑制mTORC1和mTORC2，可用于解析mTOR途径的细胞功能[1]。
在HEK-293细胞中，Ku-0063794抑制内源性免疫沉淀的mTORC1和mTORC2的活性，其以S6K1和Akt为底物，IC50值大约为10 nM。Ku-0063794可快速抑制S6K1活性和磷酸化，浓度100-300 nM 的Ku-0063794完全抑制氨基酸诱导的S6K1和S6蛋白的磷酸化。Ku-0063794抑制Akt苏氨酸308位点的磷酸化。Ku-0063794对其他靶蛋白的作用也进行了评估。然而，它不抑制检测的76种其它蛋白激酶以及七个脂质激酶，包括1a类PI3Kα和PI3Kβ[1,2]。
在转导表达BCR/ABL的反转录病毒载体的造血细胞进行骨髓重建的小鼠中，用获得的原代CML细胞进行甲基纤维素集落实验，评估Ku-0063794对PI3K信号通路的抗白血病作用。结果表明，1000 nM 的Ku-0063794完全抑制原代小鼠CML的集落形成。此外，在表达不依赖于其突变状态的BCR/ABL的BA/F3细胞中，Ku-0063794显著减少细胞增殖。Ku-0063794是理想的治疗策略，可以影响BCR/ABL下游的致癌基因信号[2]。
参考文献：
1. Garcia-Martinez J, Moran J, Clarke R, et al. Ku-0063794 is a specific inhibitor of the mammalian target of rapamycin (mTOR)[J]. Biochem. J, 2009, 421: 29-42.
2. Schuster K, Zheng J, Arbini A A, et al. Selective targeting of the mTORC1/2 protein kinase complexes leads to antileukemic effects in vitro and in vivo[J]. Blood cancer journal, 2011, 1(9): e34.
| 激酶实验 [1]: | |
mTOR 复合物激酶实验 | 使用Hepes裂解液裂解HEK-293细胞。使用结合了免疫前抗体IgG的G蛋白琼脂糖凝胶 (5 ~ 20 μL)，对溶解产物 (1 ~ 4 mg) 进行预处理。再将裂解提取物与结合了抗Rictor抗体、抗Raptor抗体或免疫前抗体IgG (5 ~ 20 μg) 的G蛋白琼脂糖凝胶 (5 ~ 20 μL)一起孵育。所有抗体共价结合到G蛋白琼脂糖凝胶上。在振动转载台上，免疫沉淀于4 °C下进行1小时。使用Hepes裂解液冲洗免疫沉淀物4次，随后使用Hepes激酶缓冲液冲洗2次。对于Raptor免疫沉淀物（用于S6K1磷酸化），在最初的2次冲洗中，缓冲液含0.5 M NaCl，以保持激酶的最佳活性。血清饥饿的 HEK-293细胞中分离的GST-Akt1与PI-103(1 μM 进行 1 小时)温育。将血清饥饿的HEK-293细胞与PI-103（1 μM，1小时）孵育，分离GST-Akt1。将血清饥饿的HEK-293细胞与Rapamycin（1 μM，1小时）孵育，分离GST-S6K1。在KU-0063794和GST-Akt1 (0.5 μg) 或GST-S6K1 (0.5 μg) 存在或不存在的情况下，加入0.1 mM ATP和10 mM MgCl2，开始mTOR反应。在30 °C下，反应在振动转载台上进行30分钟。然后加入SDS样本缓冲液终止反应。使用0.22 μm孔径大小的Spin-X过滤器将反应混合物过滤，样本进行电泳处理，然后进行免疫印迹分析。 |
| 细胞实验 [1]: | |
细胞系 | 野生型和mLST8缺陷型MEFs |
制备方法 | 在DMSO中的溶解度有限。若配制更高浓度的溶液，一般步骤如下：请将试管置于37 °C加热10分钟和/或将其置于超声波浴中震荡一段时间。原液于-20 °C可放置数月。 |
反应条件 | ~ 3 μM；24、48和72小时 |
实验结果 | 在野生型和mLST8缺陷型MEFs中，KU-0063794抑制细胞生长。 |
References: [1]. Garcia-Martinez J, Moran J, Clarke R, et al. Ku-0063794 is a specific inhibitor of the mammalian target of rapamycin (mTOR)[J]. Biochem. J, 2009, 421: 29-42. | |
| Description | KU-0063794 is a potent and highly specific dual-mTOR inhibitor of mTORC1 and mTORC2 with IC50 of ~10 nM. | |||||
| Targets | mTORC1 | mTORC2 | ||||
| IC50 | ~10 nM | ~10 nM | ||||
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