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Iodoacetyl-LC-Biotin
本产品不向个人销售,仅用作科学研究,不用于任何人体实验及非科研性质的动物实验。
Iodoacetyl-LC-Biotin图片
CAS NO:93285-75-7
包装:100mg
市场价:1850元

产品介绍

化学性质

Physical AppearanceA solid
StorageStore at -20°C
M.Wt510.43
Cas No.93285-75-7
FormulaC18H31IN4O3S
SynonymsN-Biotinyl-N'-(iodoacetyl)-1,6-hexanediamine,Iaa-biotin
Solubility≥51 mg/mL in DMSO with gentle warming; insoluble in EtOH; insoluble in H2O
Chemical Name5-[(3aS,4S,6aR)-2-oxo-1,3,3a,4,6,6a-hexahydrothieno[3,4-d]imidazol-4-yl]-N-[6-[(2-iodoacetyl)amino]hexyl]pentanamide
Canonical SMILESC1C2C(C(S1)CCCCC(=O)NCCCCCCNC(=O)CI)NC(=O)N2
运输条件蓝冰运输或根据您的需求运输。
一般建议为了使其更好的溶解,请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异,仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限,请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存,请尽快用完。

资料参考

Iodoacetyl-LC-Biotin全名为N-iodoacetyl-N-biotinylhexylenediamine,是一种不溶于水的巯基反应性生物素化试剂,需要合适的溶剂,包括二甲基亚砜(DMSO)和二甲基甲酰胺(DMF),在加入到含水反应之前需要先将其溶解。Iodoacetyl-LC-Biotin含有一个生物素双环结构,一个1,6-二氨基己烷间隔臂,连接到生物素的戊酸侧链,臂末端的碘乙酰基提供巯基反应,Iodoacetyl-LC-Biotin末端的碘乙酰基能够与蛋白质和其他分子上的巯基反应形成不可逆键。Iodoacetyl-LC-Biotin的长间隔臂能够使修饰的分子更好地结合至亲和素或链霉亲和素探针。

参考文献:
Bioconjugate Techniques , 2nd ed.  By Greg T.Hermanson (Pierce Biotechnology, Thermo Fisher Scientific, Rockford, IL). Academic Press (an imprint of Elsevier): London, Amsterdam, Burlington, San Diego . 2008. ISBN 978-0-12-370501-3.

特性

o Protein labelingbiotinylate antibodies or other proteins for use in protein methods
o Intracellular labeling—membrane-permeable, can be used to label inside cells
o Thiol-reactive—reacts with sulfhydryls (-SH), such as the side-chain of cysteine (C)
o Iodoacetyl-activated—perform reactions in the dark at pH 7.5 to 8.5 in Tris or borate buffer
o Irreversible—forms permanent amide bonds; spacer arm cannot be cleaved
o Solubility—water insoluble, must be dissolved in DMSO or DMF before further dilution in aqueous buffers
o Medium length—spacer arm is 27.1 angstroms; contains hexylenediamine extension

试验操作

生物素化方法[1]:

样品

IgG

溶解方法

可以溶于有机溶剂DMSO或者DMF。

反应条件

4mM, 室温90min

应用

免疫球蛋白G(26.7 nmol)用1ml含0.1M磷酸钠和5Mm EDTA,pH 6的缓冲液溶解。在此溶液中,加入DTT使得其在溶液中的浓度为50mM,37℃室温孵育90min,然后冷却到室温。多余的DTT用pH 8.3,50mM Tris通过分子筛层析法去除,5mM EDTA用作洗脱液。随后对具有还原巯基的IgG进行生物素化,溶于Me2SO的30 μl浓度为4 mM的 iodoacetyl-LC-biotin溶液加入,混合物在室温下避光孵育90min。最后,残留的生物素化试剂和游离的生物素用pH 7.2,0.1mM 的PBS通过72小时透析除去。BCA 蛋白试验用来确定溶液中蛋白的浓度,与IgG共价结合的总biotin 通过链霉素结合试验进行检测。

References:

[1]. Anna Bogusiewicz,Nell I. Mock, and Donald M. Mock. Instability of the biotin–protein bond in human plasma. Analytical Biochemistry 327 (2004) 156–161.

生物活性

DescriptionIodoacetyl-LC-Biotin是卤代乙酰活化的巯基反应性生物素化试剂。
靶点protein cysteinesmolecules containing sulfhydryl groups    
IC50