THZ531

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THZ531

本产品不向个人销售，仅用作科学研究，不用于任何人体实验及非科研性质的动物实验。

CAS NO:

1702809-17-3

包装与价格：

包装	价格(元)
5mg	电议
25mg	电议

产品介绍

化学性质

Physical Appearance	A solid
Storage	Store at -20°C
M.Wt	558.07
Cas No.	1702809-17-3
Formula	C₃₀H₃₂ClN₇O₂
Solubility	≥55.8 mg/mL in DMSO; insoluble in H2O; ≥4.9 mg/mL in EtOH
Chemical Name	(R,E)-N-(4-(3-((5-chloro-4-(1H-indol-3-yl)pyrimidin-2-yl)amino)piperidine-1-carbonyl)phenyl)-4-(dimethylamino)but-2-enamide
Canonical SMILES	ClC1=CN=C(N[C@H]2CN(C(C3=CC=C(NC(/C=C/CN(C)C)=O)C=C3)=O)CCC2)N=C1C4=CNC5=C4C=CC=C5
运输条件	蓝冰运输或根据您的需求运输。
一般建议	为了使其更好的溶解，请用37℃加热试管并在超声波水浴中震动片刻。不同厂家不同批次产品溶解度各有差异，仅做参考。若实验所需浓度过大至产品溶解极限，请添加助溶剂助溶或自行调整浓度。溶液形式一般不宜长期储存，请尽快用完。

资料参考

THZ531是首个CDK12和CDK13的共价抑制剂，IC50值分别为158 nM和69 nM[1]。

包含CDK12和CDK13的复合物调节转录延伸和加工，包括mRNA剪切和3’-端RNA加工。CDK12和CDK13的缺失，或者他们的辅因子细胞周期蛋白K的缺失可阻碍Pol II持续合成和RNA加工[1]。

THZ531是一种不可逆的CDK12和CDK13共价抑制剂。THZ531有效抑制CDK12和CDK13的IC50值分别为158 nM和69 nM，而抑制CDK7和CDK9的效力要弱50倍以上，IC50值分别为8.5 μM和10.5 μM。在Jurkat细胞中，THZ531可逆地减少细胞增值，IC50值为50 nM。THZ531以剂量和时间依赖的方式诱导细胞凋亡。THZ531也减少Pol II C端结构域（Pol II）的Ser2磷酸化，其是活性转录延伸的标志，从而导致关键超增强子相关的转录因子基因和DNA损伤响应(DDR)基因表达的失活[1]。

Reference:

1.Zhang T, Kwiatkowski N, Olson CM, et al. Covalent targeting of remote cysteine residues to develop CDK12 and CDK13 inhibitors. Nat Chem Biol. 2016 Oct;12(10):876-84.

试验操作

激酶实验 [1]:
激酶实验	使用0.2 μM CDK–cyclin复合物进行放射性激酶活性测定。通常，在含有0.2 μM活性激酶的35 μl反应体积在激酶缓冲液中平衡，激酶缓冲液包含40 mM Hepes（pH 7.6）、34 mM NaCl、34 mM KCl、10 mM MgCl2、5％甘油和1×PhosSTOP。加入预冷的ATP至终浓度为200 μM和3μCi[γ-32P] ATP和50 μM含有5个磷酸化位点的底物肽，并将反应混合物在30℃、350 rpm的恒温混合器中温育30分钟。通过加入终浓度为50 mM的EDTA来终止反应。使用Optitran BA-S85增强膜将各15 μl的样点等分到纸方块上。用0.75％（v/v）磷酸将纸方块洗涤3次，持续5分钟，每个纸方块至少使用5 ml洗涤溶液。在Beckman扫描计数器（Beckman Coulter）中计数放射性1分钟。将化合物THZ531以不同浓度加入到0.2 μM CDK–cyclin复合物中，并在30℃和350 rpm下孵育1至540分钟，然后将ATP和底物加入到反应混合物中。
细胞实验[1]:
细胞系	Jurkat细胞
溶解方法	该化合物可溶于DMSO。若获取更高浓度的溶液，可在37℃下孵育10分钟，随后在超声波浴中摇匀。-20℃以下可储存数月。
反应条件	50-1200 nM，6 h
应用	THZ531导致Jurkat细胞增殖的显著和不可逆的降低，IC50为50 nM。THZ531以剂量依赖性和时间依赖性方式增加亚G1期细胞含量。高剂量的THZ531造成明显的膜联蛋白V信号，72小时引发30-40％的膜联蛋白V染色细胞。THZ531选择性降低Ser2磷酸化水平，而对CTD pSer5或pSer7水平无明显影响。50 nM THZ531引起一小部分基因的表达丧失。
注意事项	由于实验环境的不同，实际溶解度可能与理论值略有不同，请测试室内所有化合物的溶解度。
References: [1]. Zhang T, Kwiatkowski N, Olson C M, et al. Covalent targeting of remote cysteine residues to develop CDK12 and CDK13 inhibitors[J]. Nature chemical biology, 2016.