包装: | 25 rxns |
市场价: | 8800元 |
HyperScribe(TM) All in One mRNA Synthesis Kit II (EZ Cap Reagent AG (3' OMe), T7, poly(A))试剂盒用于在体外快速合成EZ Cap Reagent AG (3' OMe)加帽和poly(A)加尾的mRNA。通过使用T7 RNA聚合酶,加帽试剂(EZ Cap Reagent AG (3' OMe),货号B8178)以共转录方式被掺入mRNA 5'端,形成Cap1结构。EZ Cap Reagent AG (3' OMe)的添加保护mRNA免于降解并确保高翻译效率。经过短暂的DNase I处理以去除模板DNA后,加帽的mRNA可以利用Poly(A)聚合酶在3'端进行加尾。聚腺苷酸化(即Poly(A)尾的添加)使mRNA更加稳定并提高mRNA的翻译起始效率。
该试剂盒有诸多应用,例如体外翻译、反义RNA和RNAi实验、RNA疫苗,RNA结构和功能研究,核酶生物化学,RNase蛋白质实验和基于探针的杂交印迹。
每次标准反应为20 μL,该试剂盒可进行25次反应。对于每次的标准反应,1 μg 的对照模板可产生25-180 μg 的RNA。
(1)mRNA的合成(EZ Cap Reagent AG (3' OMe)加帽) | |
组分 | 25 rxns |
T7 RNA Polymerase Mix | 50 μL |
10X Reaction Buffer | 50 μL |
ATP (20 mM) | 50 μL |
UTP (20 mM) | 50 μL |
CTP (20 mM) | 50 μL |
GTP (20 mM) | 37.5 μL |
EZ Cap Reagent AG (3' OMe) (60 mM) | 50 μL |
Control Template (0.5 μg/μL) | 5 μL |
RNase-free H2O | 0.5 mL |
所有的组分请在-20°C保存。 | |
(2)mRNA的加尾 | |
组分 | 25 rxns |
E-PAP (2 units/μL) | 100 μL |
5X E-PAP Buffer | 600 μL |
ATP Solution (100 mM) | 100 μL |
25 mM MnCl2 | 250 μL |
Nuclease - free Water | 1 mL x2 |
所有的组分请在-20°C保存。 |