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ECL试剂检测的核心原理为氧化反应发光：鲁米诺(lumino)作为发光底物的主要成分，在碱性条件下，通过辣根过氧化酶(HRP)催化，被H₂O₂氧化生成3-氨基邻苯二酸的激发态中间体，当其回到基态时发出光子，最大发射波长为425 nm。光子信号可通过X射线胶片或CCD成像仪被捕获。

GlpBio超高灵敏度ECL试剂盒可在HRP和过氧化物存在下氧化鲁米诺，从而在飞克级抗原范围内进行检测。 该反应产生延长的化学发光，可以在X射线胶片或数字成像系统上看到该化学发光。GlpBio超高灵敏度ECL试剂盒可产生强效，长寿命的信号，再加上极低的背景水平，可延长曝光时间，从而检测低丰度蛋白质。