生物活性
FDA可透过细胞膜并作为荧光素积蓄在活细胞内。由于荧光素较BCECF或Calcein的亲水性低,因此荧光素从细胞中渗漏的量也高。FDA是一种非荧光性疏水性荧光素衍生物,它可以穿透细胞膜进入细胞,通过细胞内酯酶催化水解二乙酸酯基团产生具有高强度的荧光产物荧光素。荧光分子在具有完整细胞膜的细胞内积累,因此这种绿色荧光可以作为一种细胞活力的标签。不具有完整细胞膜或者新陈代谢活性的细胞,不能在细胞内积累荧光产物,因此不能显现绿色荧光。FDA可以与染料PI联合使用,无活性的死细胞被PI着色,发出红色荧光;有活性的细胞PI无法着色,在FDA作用下,紧发出绿色荧光。这两种颜色可以很好的辨别死细胞与活细胞,与单一颜色检测相比,它提供了一种更为准确的活细胞定量检测方法。FDA也可用于流式细胞仪。荧光素的激发和发射波长分别是488nm和530nm。
化学数据
分子量 | 416.38 |
分子式 | C24H16O7 |
CAS号 | 596-09-8 |
纯度 | >99% |
溶解性(25°C) | DMSO ≥ 15 mg/mL |
储存和运输条件 | -20°C, protect from light, dry, sealed 常温运输及临时存放 |
不同实验动物依据体表面积的等效剂量转换表(数据来源于FDA指南)
| 小鼠 | 大鼠 | 兔 | 豚鼠 | 仓鼠 | 狗 |
重量 (kg) | 0.02 | 0.15 | 1.8 | 0.4 | 0.08 | 10 |
体表面积 (m2) | 0.007 | 0.025 | 0.15 | 0.05 | 0.02 | 0.5 |
Km系数 | 3 | 6 | 12 | 8 | 5 | 20 |
动物 A (mg/kg) = 动物 B (mg/kg) × | 动物 B的Km系数 |
动物 A的Km系数 |
例如,依据体表面积折算法,将化合物用于小鼠的剂量20 mg/kg 换算成大鼠的剂量,需要将20 mg/kg 乘以小鼠的Km系数(3),再除以大鼠的Km系数(6),得到化合物用于大鼠的等效剂量为10 mg/kg。
储备液配制
以下数据基于产品分子量,对于特殊产品,请参照COA中的储备液配制条件和说明进行操作。
Concentration / Solvent Volume / Mass | 1 mg | 5 mg | 10 mg |
---|
1 mM | 2.4017 mL | 12.0083 mL | 24.0165 mL |
5 mM | 0.4803 mL | 2.4017 mL | 4.8033 mL |
10 mM | 0.2402 mL | 1.2008 mL | 2.4017 mL |