Rhodamine dyes are membrane-permeable cationic fluorescent probes that specifically recognize mitochondrial membrane potentials, thereby attaching to mitochondria and producing bright fluorescence, and at certain concentrations, rhodamine dyes have low toxicity to cells, so they are commonly used to detect mitochondria in animal cells, plant cells, andmicroorganisms^[1].

1.Rhodamine 6G 工作液的配制
1.1 制备储存液
用 525 μL 无水 DMSO 稀释 1 mg Rhodamine 6G 去配制 5 mM 的储备液。
1.2 工作液的配制
用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液，配制成 1-20 μM 的 Rhodamine 6G 工作液。
注：请根据实际情况调整 Rhodamine 6G 工作液浓度，且现用现配。
2. 细胞染色(悬浮细胞)
2.1 离心收集细胞，加入 PBS 洗涤两次，每次 5 分钟。细胞密度在1×10⁶/mL。
2.2 加入 1 mL Rhodamine 6G 工作液，室温孵育 30-60 分钟。
2.3 400 g，离心 3-4 分钟，弃去上清。
2.4 加入 PBS 洗涤细胞两次，每次 5 分钟。
2.5 用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。
3. 细胞染色(贴壁细胞)
3.1 将贴壁细胞培养于无菌盖玻片上。
3.2 从培养基中移出盖玻片，吸除多余培养基。
3.3 加入 100 μL 染料工作液，轻轻晃动使其完全覆盖细胞，孵育5-30 分钟。
3.4 吸去染料工作液，用培养基洗2-3次，每次5 分钟 ，使用荧光显微镜或流式细胞仪进行观察。

Melanoma-transplanted mice receiving Rhodamine 6G demonstrate prolonged survival, improved clinical parameters, inhibited tumor growth and metastases count, compared to their untreated counterparts. Twice-a-week 10-6M Rhodamine 6G regimen yield the most prominent results^[2]. The Rhodamine-6G enters the circulatory system and labels leukocytes. It is possible to monitor changes in the interactions between leukocytes and the endothelium by determining the numbers of rolling and adhering leukocytes as well as the total flux of these cells^[3].

479.01

Solid

C₂₈H₃₁ClN₂O₃

989-38-8

罗丹明6G

Room temperature in continental US; may vary elsewhere.

4°C, sealed storage, away from moisture and light

*In solvent : -80°C, 6 months; -20°C, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)

DMSO : 25 mg/mL(52.19 mM;Need ultrasonic)

H₂O : 10 mg/mL(20.88 mM;ultrasonic and warming and heat to 60℃)

请根据产品在不同溶剂中的溶解度选择合适的溶剂配制储备液；一旦配成溶液，请分装保存，避免反复冻融造成的产品失效。
储备液的保存方式和期限：-80℃, 6 months; -20℃, 1 month (sealed storage, away from moisture and light)。-80℃ 储存时，请在 6 个月内使用，-20℃ 储存时，请在 1 个月内使用。

请根据您的实验动物和给药方式选择适当的溶解方案。以下溶解方案都请先按照In Vitro方式配制澄清的储备液，再依次添加助溶剂：

——为保证实验结果的可靠性，澄清的储备液可以根据储存条件，适当保存；体内实验的工作液，建议您现用现配，当天使用； 以下溶剂前显示的百
分比是指该溶剂在您配制终溶液中的体积占比；如在配制过程中出现沉淀、析出现象，可以通过加热和/或超声的方式助溶

• 1.

  请依序添加每种溶剂： PBS

  Solubility: 4 mg/mL (8.35 mM); Clear solution; Need ultrasonic and warming and heat to 60℃
• 2.

  请依序添加每种溶剂： 10% DMSO    40%PEG300   5%Tween-80   45% saline

  Solubility: 2.5 mg/mL (5.22 mM); Suspended solution; Need ultrasonic

  此方案可获得 2.5 mg/mL (5.22 mM) 的均匀悬浊液，悬浊液可用于口服和腹腔注射。

  以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 400 μL PEG300 中，混合均匀；向上述体系中加入50 μL Tween-80，混合均匀；然后继续加入 450 μL生理盐水定容至 1 mL。

  将 0.9 g 氯化钠，完全溶解于 100 mL ddH2O 中，得到澄清透明的生理盐水溶液
• 3.

  请依序添加每种溶剂： 10% DMSO    90% (20%SBE-β-CDin saline)

  Solubility: 2.5 mg/mL (5.22 mM); Suspended solution; Need ultrasonic

  此方案可获得 2.5 mg/mL (5.22 mM) 的均匀悬浊液，悬浊液可用于口服和腹腔注射。

  以 1 mL 工作液为例，取 100 μL 25.0 mg/mL 的澄清 DMSO 储备液加到 900 μL20% 的 SBE-β-CD 生理盐水水溶液中，混合均匀。

  将 2 g 磺丁基醚 β-环糊精加入 5 mL 生理盐水中，再用生理盐水定容至 10 mL，完全溶解，澄清透明