葡萄糖-6-磷酸脱氢酶测定是研究葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的主要方法,当其测定结果低于正常时,常作为数葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症的研究依据。通过葡萄糖-6-磷酸脱氢酶的测定,对于研究药物试验引起的溶血性贫血具有极高的科研价值。
检测原理:
正常血红蛋白是亚铁血红蛋白,可被氧化成为高铁血红蛋白,当红细胞内G-6-PD含量正常时,通过戊糖代谢旁路形成的NADPH可作为血液中高铁血红
蛋白还原酶的辅酶,并在递氢体的参与下,高铁血红蛋白还原为亚铁血红蛋白。当红细胞内缺少G-6-PD时,高铁血红蛋白不能被还原,通过测定高铁血红蛋白
的吸光度,可算出G-6-PD的活力高低。
产品优点如下:
1、稳定性好:试剂盒2~8℃存放6个月有效。
2、再现性好:变异系数CV=1.3%。
3、回收试验: X =102%。
4、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
所需仪器及自备试剂:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为640nm)
2、恒温水浴箱或气浴箱 (孵育温度为37℃)
3、台式离心机
4、漩涡混匀器
5、微量移液器
样本收集与前处理:
红细胞:需按照试剂盒中说明书上红细胞的测定方法进行提取后测定。
具体的样本前处理:参考我们随货发送的《实验方法学》以及试剂盒中详细说明书。
操作流程:
1、按步骤加入样本和R1、R2
2、漩涡混匀,加塞37℃孵育3小时
3、取以上混合液50l,加入R3, 3000转/分钟离心10分钟
4、取上清,550nm波长,1cm光径,比色