在酸性溶液和还原剂的作用下,使运铁蛋白中铁与蛋白分离,使血清中的高铁还原成亚铁,后者与双吡啶结合成粉红色的络合物,在一定范围内,铁离子的多少与色泽成正比。
产品优点如下:
1、快速简便:全程约2小时,可测50例左右样本。
2、稳定性好:试剂盒4℃保存3个月。
3、再现性好:变异系数CV=1.5%。
4、回收试验: X =100%。
5、受外界影响因素小:干扰因素少,重复性强。
6、测试面广:可测各种动物组织,效果均佳。
试剂的组成与配制:(50 管/48 样)
100mg/L 铁标准贮备液:1ml×1 支,4°C保存 3 个月。
2mg/L 铁标准应用液的配制:取铁标准贮备液 0.2ml 加双蒸水定溶至 10ml,4°C保存。
铁显色剂:2 号甲粉×1 支,2 号乙粉×1 支,2 号丙液 100ml×1 瓶,4°C保存 6 个月。使用时将 2 号甲粉、2 号乙粉倒入 100ml2 号丙液中,充分混匀,溶解完全,即为铁显色剂,4°C避光保存。
所需仪器及自备试剂:
1、分光光度计/酶标仪/半自动生化分析仪(比色测定波长为520nm)
2、台式离心机
3、漩涡混匀器
4、微量移液器
样本收集与前处理:
血清(浆)可直接测定。
动物组织的样本前处理:准确称取待测动物组织的重量,按重量(g):体积(ml)=1:9的比例,加入 9 倍体积的生理盐水, 冰水浴条件机械匀浆,2500 转/分,离心 10 分钟,取上清液待测。
植物组织的样本前处理:准确称取待测植物组织的重量,按重量(g):体积(ml)=1:9 的比例,加入 9 倍体积的匀浆介质(匀浆介质推荐使用 0.1mol/L pH7~7.4 磷酸盐缓冲液),冰水浴条件下机械匀浆,3500 转/分,离心 10 分钟,取上清液待测。
操作流程:
1、按步骤加入样本和R1、R2、R3
2、沸水浴5分中,冷却后离心,3500r/min
3、吸取上清夜,蒸馏水调零
4、520nm波长,0.5cm光径,比色