基本信息
分子式 | C26H23F2N3O3 |
分子量 | 463.48 |
存储条件 | Freezer -20℃ |
产品描述
Dibenzazepine (YO-01027)是一种二肽γ-secretase抑制剂,作用于APPL和Notch分裂, 无细胞试验中IC50分别为2.6 nM和2.9 nM。
靶点(IC50 & Targe)
γ secretase (APPL),2.6nM
γ secretase(Notch),2.9nM
体外研究
YO-01027直接与γ-分泌酶复合物相互作用,并靶向作用于N-端早老素片段。逐渐增加浓度的YO-01027对表达APPL或Notch的细胞给药,导致APPL CTF片段逐渐积累,并完全地剂量依赖性减少NICD产生。[1]10 μM YO-01027减少乳腺癌干细胞(BCSC)数量和活性。[2]一项最近的研究表明,YO-01027通过Notch抑制,浓度依赖性削弱融合前和融合阶段未分化细胞中黏蛋白MUC16的生物合成,但是在有丝分裂后不同阶段的细胞中无此作用。[3]
体内研究
YO-01027,在细胞注射的当天和随后的3天以1 mg/mL的剂量腹腔注射,显著减少MCF7肿瘤,而对MDA-MB-231肿瘤没有作用,与对照组小鼠(18-28天)相比,也会增加潜伏期。YO-01027处理MCF7肿瘤,会显著减少肿瘤体积。[2] YO-01027对C57BL/6小鼠进行处理,抑制上皮细胞增殖,并剂量依赖性诱导肠腺瘤中杯状细胞分化。[4]
激酶实验
γ-分泌酶活性的药理学抑制:
对于YO-01027,先导实验通过范围为0.1 nM到250 nM的不同药物浓度进行,以测定YO-01027的有效线性范围和最大抑制剂量。采集蛋白质6小时之前,根据Notch 或 APPL表达的诱导, YO-01027以所需浓度加入S2细胞培养基。对于每个样品,YO-01027 也以相应浓度在裂解缓冲液中,用于蛋白质萃取和免疫印迹分析。
细胞实验
Cell lines: BCSC
Concentrations: 10 μM
Incubation Time: 3天
Method: 细胞以≤1 × 106重悬浮在100μL分类缓冲液中(包含0.5%牛血清的PBS,2 mM EDTA),并与结合前初级抗体BEREP4-FITC (1:10),CD44-APC (1:20),和CD24-PE (1:10)在4 °C下培育10分钟。将细胞在PBS中洗涤,在800×g下离心2分钟。对于分析,细胞重悬浮在500μL分类缓冲液中,荧光性使用FACSCalibur测量,并使用WinMIDI 2.8分析。对于分类,细胞与初级抗体培育后,重悬浮在1×HBSS中。HBSS作为鞘液,在16 p.s.i.下使用FACSAria对细胞进行分类。FACS分选出的CD24low细胞群是CD24阳性细胞加上所有CD24阴性细胞的五分之一。
(Only for Reference)
动物实验
Animal Models: C57BL/6 小鼠
Formulation: YO-01027悬浮在 0.5% (w/v) 羟丙基甲基纤维素 (甲基纤维素 E4M) 和 0.1% (w/v) Tween 80水溶液中
Dosages: 0,3,10,30 μmol/kg
Administration: 每天腹腔注射
(Only for Reference)
参考文献
[1] Groth C, et al, Mol Pharmacol, 2010, 77(4), 567-574.
[2] Harrison H, et al, Cancer Res, 2010, 70(2), 709-718.
[3] Xiong L, et al, Invest Ophthalmol Vis Sci, 2011, 52(8), 5641-5646.
[4] Van Es JH, et al, Nature, 2005, 435(7044), 959-963.
安全信息
图形或危害标志 | |
提示语 | Warning |
危险说明 | H315 H319 H335 |
防范说明 | P261 P305+P351+P338 |
WGK | 3 |
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