基本信息
分子式 | C29H40N2O9 |
分子量 | 560.64 |
MDL编码 | MFCD00274570 |
Beilstein | 6835113 |
存储条件 | Freezer -20℃ |
产品描述
Geldanamycin是一种天然的HSP90抑制剂,Kd为1.2 μM,特异性干扰糖皮质激素受体(GR)/HSP联合。
靶点(IC50 & Targe)
HSP90,1.2μM(Kd)
p185,70nM
体外研究
Geldanamycin结合于Hsp90s (残基1-220) N-末端结构域的ATP结合位点。Geldanamycin剂量依赖性抑制Hsp90的ATPase活性。[1] 在A2780人卵巢细胞系中,Geldanamycin引起剂量依赖性G2期阻滞,并可逆抑制其进入S期。该抑制作用伴随p53的增加,最终证明是p53依赖性的。[2] Geldanamycin引起p185受体蛋白-酪氨酸激酶的泛素化和蛋白酶体降解,IC50为70 nM。[3, 4] Geldanamycin是典型的抗肿瘤试剂,对一组60个人肿瘤细胞系的平均GI50为0.18 μM。[5]
体内研究
在FRE/erbB-2 小鼠体内,Geldanamycin (50 mg//kg)对pl85-相关的磷酸酪氨酸水平表现出30%的抑制。[6]
激酶实验
核苷结合的等温滴定量热法(ITC):
滴定实验使用MSC系统进行。在每个实验中,16等份15 μL geldanamycin (300 μM在1% DMSO中)在25 °C下注射到1.3 mL蛋白质(31 μM在20 mMTris-HCl中, pH 7.5, 1 mMEDTA),得到的数据减去稀释热后进行拟合。将geldanamycin加入缓冲液和缓冲液加入蛋白质的稀释热在单独实验中测定。在核苷酸结合位点没有观察到DMSO的结合。滴定数据使用非线性最小二乘法曲线拟合算法拟合,该算法有三个不固定变量:化学计量,结合常数(Kb) 1/Kd),和相互作用焓的变化(ΔH°)。Geldanamycin结合到完整酵母Hsp90和Hsp90 N-末端结构域,估计的解离常数分别为1.22 μM和0.78 μM。结合到C-末端片段时,没有观察到有意义的热量。
细胞实验
Cell lines: A2780人卵巢癌细胞系
Concentrations: 0.001-10 μM
Incubation Time: 3小时
Method: 指数生长的细胞用Geldanamycin处理,不同时期的DNA合成通过溴脱氧尿苷(BrdUrd)的整合和流式细胞分析术评估。在此期间,处理的和未处理的细胞,总细胞数没有显著的差别。BrdUrd (10 μM)在37 °C下4小时的培育期间进行整合,将细胞采集并固定在70%乙醇中。DNA通过2 N HC1变性后,细胞用抗- BrdUrd小鼠单克隆抗体培育,随后用异硫氰酸荧光素(FITC)-连接的山羊抗-小鼠IgG培育。细胞在室温下用碘化丙啶着色30分钟,使用Coulter EPICS Profile分析器通过流式细胞术分析。
(Only for Reference)
动物实验
Animal Models: 负荷FRE/erbB-2肿瘤的nu/nu小鼠
Formulation: Geldanamycin溶于DMSO。
Dosages: 50 mg/kg
Administration: 通过腹腔注射给药
(Only for Reference)
参考文献
[1] Roe SM, et al, J Med Chem, 1999, 42(2), 260-266.
[2] Mcllwrath AJ, et al, Cancer Chemother Pharmacol, 1996, 37(5), 423-428.
[3] Mimnaugh EG, et al, J Biol Chem 1996, 271(37), 22796-22801.
[4] Miller P, et al, Cancer Res, 1994, 54(10), 2724-2730.
[5] Supko JG, et al, Cancer Chemother Pharmacol, 1995, 36(4), 305-315.
[6] Schnur RC, et al. J Med Chem, 1995, 38(19), 3806-3812.
安全信息
防范说明 | P262 |
WGK | 2 |
RTECS | LX8920000 |
百灵威科技