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RO-3306

品牌
J&K
CAS
872573-93-8
货号
2062938
规格纯度
96%, 一种有效, 选择性的 CDK1 抑制剂
参考价格
713 *本价格含增值税费
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服务
  • 原厂保证
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  • 增值税票
数量
-+
产品名称:
872573-93-8
RO-3306
产品介绍:

基本信息

分子式C18H13N3OS2
分子量351.45
存储条件Freezer -20℃

产品描述

RO-3306是一种ATP竞争性的选择性 CDK1 抑制剂,Ki 为20 nM,选择性是其他各种人类激酶的15倍多。

靶点(IC50 & Targe)

CDK1,20nM(Ki)

ERK,1980nM(Ki)

PKA,>2000nM(Ki)

PKCδ,318nM(Ki)

SGK,497nM(Ki)

体外研究

RO-3306抑制CDK1/cyclin B1,CDK1/cyclin A,CDK2/cyclin E,和CDK4/cyclin D活性,Ki分别为35 nM,110 nM,340 nM,和>2000 nM。HCT116,SW480,和HeLa细胞用RO-3306处理20小时导致细胞周期完全阻滞在G2/M期。HCT116和SW480的增殖被RO-3306有效阻断。RO-3306似乎在癌细胞(HCT116和SW480)中比在非致瘤性细胞(MCF 10A和MCF 12A)中具有更强的促凋亡作用。[1] 10 μM 浓度的RO-3306有效阻止卵母细胞成熟。[2]

激酶实验

CDK试验:

CDK1 cyclin B1,CDK1 cyclin A,CDK2 cyclin E,和CDK4 cyclin D通过均相时间分辨荧光法在96孔格式中测量。实验缓冲液包含25 mM Hepes,6.25 mM MgCl2,0.003% Tween 20,0.3 mg/mL BSA,1.5 mM DTT,和如下含量的ATP: 162 μM (CDK1),90 mM (CDK2),或135 μM (CDK4)。CDK1和CDK2缓冲液包含10 mM MgCl2。测试化合物在20 μL实验缓冲液中稀释为它们终浓度的3倍,反应通过加入40 μL包含pRB底物(0.185μM)的试验缓冲液起始。板在37°C下连续搅拌培养30分钟,反应通过加入15 μL 含1.6μM 抗磷酸pRB抗体(Ser-780)的25 mM Hepes,24 mM EDTA,和0.2 mg/mL BSA终止。再振荡培育30分钟后,加入15μL 包含3nM Lance-Eu-W1024-labeledanti-rabbitIgG和60 nM Alophycocyanin共轭的抗-His-6 抗体的25 mM Hepes,以及0.5 mg/mL BSA,培育1小时。板在Victor-V多标阅读器上以340 nm激发波长和615 nm与665 nm发射波长读取数据。IC50值根据665 nm下的读数值进行计算,并归一化为615 nm下铕的读数值。Ki值根据公式Ki= IC50/(1 + S/Km )计算,其中S是试验中ATP浓度,Km是相对ATP的Michaelis-Menten常数。对激酶组的抑制活性通过IMAP测定技术确定。

细胞实验

Cell lines: MDA-MB-231 细胞系

Concentrations: 20 μM

Incubation Time: 72 h

Method: 对数生长期细胞(25,000)接种于96孔板,在37℃培养箱中与CO2一起培养,24小时后,给予不同浓度RO-3306以测定达到50%生长抑制(IC50)的药物浓度。MTT (20 μL,包含5mg/mL储备溶液的生理盐水)加入每孔中,细胞培养4小时。移除上清液,来自活细胞的甲瓒晶体溶解在200 μL无水DMSO中。吸光度使用550模式酶标仪在565 nm波长下检测。

(Only for Reference)

参考文献

[1] Vassilev LT, et al. Proc Natl Acad Sci U S A. 2006, 103(28), 10660-10665.

[2] Jang WI, et al. Anim Reprod Sci. 2014, 144(3-4), 102-108.

[3] Xia Q, et al. Int J Oncol. 2014, 44(3), 735-744.

安全信息

图形或危害标志
危险说明H302
H410
防范说明P264
P270
P273
P301+P312
P330
P391
P501
UN号码3077
危险分类9
包装等级III

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