AZD8186

基本信息

产品描述

AZD8186是一种有效的选择性PI3Kβ和PI3Kδ抑制剂，IC50分别为 4 nM 和 12 nM。Phase 1。

靶点（IC50 & Targe）

PI3Kα,35nM

PI3Kβ,4nM

PI3Kγ,675nM

PI3Kδ,12nM

体外研究

对PI3Kβ抑制敏感的MDA-MB-468细胞和对PI3Kδ抑制敏感的Jeko B细胞中，AZD8186有效抑制p-Akt，IC50分别为3 nM和4 nM。[1] AZD8186在大多数PTEN缺失的细胞系中表现出最高的生长抑制活性，GI50 <1 μM。[2]

体内研究

负荷PTEN-缺失的PC3前列腺肿瘤异种移植物的裸鼠中，AZD8186 (100 mg/kg, p.o.)强烈抑制Akt磷酸化水平，并引起显著的肿瘤生长抑制。与ABT结合使用时，AZD8186 (60 mg/kg, p.o.)完全抑制肿瘤生长。[1]在小鼠PTEN-缺失的 TNBC 模型HCC70和MDA-MB-468，以及前列腺模型HID28中，AZD8186 (50 mg/kg, p.o.)也会抑制肿瘤的生长。[2] AZD8186与化学去势的结合疗法导致持久的肿瘤退化，该作用在治疗停止后依然持续。[3]

激酶实验

PI3Kα，PI3Kβ，PI3Kγ和 PI3Kδ酶试验:

PI3Kα，PI3Kβ，PI3Kγ和PI3Kδ人重组PI3K亚型的抑制使用Kinase-Glo Plus试剂盒进行评估。使用Echo 555将DMSO溶解的化合物分配加入白色384-孔培养基整合的微孔板，以构建最高浓度为100 μM 的12点半对数浓度-响应曲线。加入包含3 μL适当PI3K的Tris缓冲液(50 mM Tris pH7.4，0.05% CHAPS，2.1 mM DTT，和10 mM MgCl2)。将板覆盖，并与化合物预培养20分钟，然后加入3 μL包含PIP2和ATP的底物溶液。80分钟后，加入激酶Glo检测溶液停止反应。将板覆盖，室温下培育30分钟，然后使用PHERAstar酶标仪读取荧光信号。试验中DMSO，ATP和PIP2的终浓度分别为2%，8 μM，和80 μM。PI3Kα，PI3Kβ，PI3Kγ和PI3Kδ的终浓度分别为20 nM，20 nM，45 nM 和30 nM。对于PI3Kα，PI3Kβ 和 PI3Kδ，活性酶的浓度根据酶试验中紧密结合的限度测定区间概述确定。对于PI3Kγ，酶浓度通过Bradford试验测定。IC50值使用Genedata Screener计算。

细胞实验

Cell lines: 一类癌细胞系

Concentrations: ～30 μM

Incubation Time: 72小时

Method: 在72小时试验期间，细胞以允许对数生长的密度接种到96孔板，并在37°C，5% CO2下培育过夜。细胞用AZD8186 (30-0.003 μM)处理72小时，细胞增殖使用MTS测量。CellTiter水相非放射性细胞增殖测定试剂的使用与制造商的方案一致，吸光度通过Tecan Ultra仪器测量。进行预先剂量测量，然后测定需要将处理细胞的生长减少到未处理细胞一半(GI50)的浓度值。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 负荷 PTEN-缺失的PC3前列腺肿瘤异种移植物的裸鼠

Formulation: 10% DMSO / 60% TEG/ 30% WFI

Dosages: 100 mg/kg b.i.d

Administration: p.o.

(Only for Reference)

参考文献

[1] Barlaam B, et al. J Med Chem. 2015, 58(2), 943-962.

[2] Hancox U, et al. Mol Cancer Ther. 2015, 14(1), 48-58.

[3] Marques RB, et al. Eur Urol. 2015, 67(6), 1177-1185.