RGFP966

基本信息

产品描述

RGFP966是一种HDAC3抑制剂，无细胞试验中IC50为0.08μM ，比作用于其他HDAC选择性高200倍以上。

靶点（IC50 & Targe）

HDAC3,80nM

体外研究

RGFP966是作用缓慢的竞争性紧密结合的HDAC抑制剂，抑制HDAC3的IC 50为0.08 μM，而在浓度高达15 μM时，对任何其它的HDAC无有效抑制。[1] 在2种CTCL细胞系中，RGFP966处理24小时后免疫印迹分析，结果表明H3K9/K14，H3K27和H4K5的乙酰化增加，而H3K56ac没有。RGFP966降低CTCL（皮肤T细胞淋巴瘤）细胞生长，是由于细胞凋亡增加，这是与DNA损伤有关的和受损的S期相关联。RGFP966导致药物治疗的第一个小时内显著减少DNA复制叉的速度。[2]

体内研究

RGFP966治疗（10毫克/千克）增强长期记忆。RGFP966（3或10毫克/公斤，皮下注射）有利于灭绝和防止可卡因条件性位置偏爱复发。[1]

激酶实验

去乙酰化分析:去乙酰化分析是基于同质荧光释放法。纯化的重组酶是和在图中所指示的浓度梯度抑制剂孵育，预温育时间从0到3个小时，在标准的HDAC缓冲液中进行。乙酰基-赖氨酸（AC）-AMC底物（在10μM，对应于HDAC1和HDAC3的Km值）在预温育之后加入。该反应运行1小时。胰蛋白酶肽酶在5mg/ml的终浓度，在1小时后加入，然后荧光发射并用Tecan M20096孔读板器测定。

细胞实验

Cell lines: HH和Hut78 CTCL细胞系

Concentrations: ～10μM

Incubation Time: 24到72小时

Method: 细胞计数并分在T25（Corning）培养瓶中，密度是26105个细胞/ mL。然后将细胞用DMSO或HDIs在0小时处理一次。100ml的等分试样从每个培养瓶中取出，一式三份，在处理0小时，24小时，48小时，和72小时后取出并分到96孔板中，10毫升阿尔玛蓝加入到每个孔中。孵育4小时后，荧光使用Biotek Synergy MX酶标仪测定。

(Only for Reference)

动物实验

Animal Models: 小鼠

Formulation: 溶解于DMSO中并稀释于30％（重量/体积）的羟丙基-β-环糊精和100mM的醋酸钠（pH值5.4）。

Dosages: 10 毫克/千克, 10.0 毫升/千克

Administration: 皮下注射

(Only for Reference)

参考文献

[1] Malvaez M, et al. PNAS, 2013, 110(7), 2647-2652.

[2] Wells CE, et al. PLoS One, 2013, 8(7), e68915.