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浅谈牛血清的选购技巧
2016.03.17   点击863次

    血清,由于其复杂的内在成分和难以控制的外界因素,它既是细胞生长的必备营养,又是细胞死亡的致命毒药,可能会因为一时的疏忽大意选错了血清,导致我们辛辛苦苦培养的细胞意外死亡,不得不重新培养,既浪费时间又浪费金钱。
    那么,该如何选择血清呢?下面就牛血清来谈谈几点选购技巧:
    1、明确细胞种类,选择血清的类型
    胎牛血清(FBS):八月龄胎牛心脏穿刺取血。适用于专业的研究和试验,包括干细胞研究、免疫分析和抗体生产。
    新生牛血清/小牛血清(NBCS):自出生20天内的小牛采血分离血清,适用于对条件要求较低的细胞种类培养。有些非常优质的小牛血清也可用于培养间充质干细胞、HEK293、Hela、CHO等细胞。
    2、分辨血清来源,切勿上当受骗
    由于疯牛病的原因,到目前为止我国政府仍然禁止从北美洲、欧洲和日本等有疫情的地区进口牛血清,因此市面上的牛血清大多来自澳洲、南美洲,或是国产的。至于来源于巴西的、以色列的血清,大家还是谨慎选择。
    3、严查生产质检,减低批间差别
    血清批次间的差别是不可避免的,这种差异来源于不同的制备方法和除菌方法、动物的年龄差别、血清的储存条件、动物的来源等。因此血清的生产、过滤、消毒、质检流程的严格控制以及长期稳定的血清供应更显的尤为重要,在这方面国产的很多血清就望尘莫及了。
    4、妥善保存血清,避免反复冻融
    血清应分装后保存在-5℃至-20℃,避免反复冻融,若存放在4℃不可超过一个月。解冻血清时,应先将血清至于2-8℃冰箱,并经常摇匀使之溶解,然后至室温放置使之升温,绝对不可将冷冻的血清直接放入37℃水浴或者温箱中。

    在拿到血清之后,最先接触的是其外观。对于缺少细胞培养经验的人来说,外观的判断就显得尤为重要。对于胎牛血清,应从以下几方面加以判断:
    1、颜色
    根据血红蛋白含量的不同,胎牛血清可表现出黄色或红色,我国的细胞培养用血清标准是不高于20mg/dl,实际上,血红蛋白含量的高低对血清并无直接影响,这个指标的意义在于能体现出采血过程的严谨规范程度,良好的操作能降低血清的溶血。
    国产血清也很少有标准意义上的胎牛血清,因为国产血清的采血点很分散,大多是由屠户采血后马上离心收集,所以很少会有溶血,因此表现出明亮的蜡黄色。
    进口胎牛血清则或多或少总有点溶血,因为真正的胎牛血清凝血功能差,红细胞容易破裂。
    总的来说,国产的血清呈现出蜡黄。进口的血清,质量最好的呈现出谈黄、微红色,差点的呈现出橘红色或鲜红色。但是,热灭活血清或保存不当的血清,由于血红蛋白被破坏氧化,会呈现出暗红,甚至咖啡色。
    2、沉淀
    很多血清用户在拿到血清之后,会发现进口血清有沉淀,从而怀疑血清的质量问题,这是没有根据的。
    血清中的沉淀是由纤维蛋白的凝聚产生,对血清质量没有任何影响,沉淀的产生原因很多,和厂家的加工生产方式密切相关。
    进口的胎牛血清,过滤分装前很少会反复冻融,生产后的成品也是清澈的,但随着时间的推移,血清中的大量纤维蛋白会析出形成沉淀。进口新生牛血清,一般牛龄都在2周左右,血清中的各种蛋白含量明显偏高,生产后血清可能会浑浊,甚至有大量沉淀。
    由于购买回来的血清都是冰冻状态,使用时需要融化,融化过程最好在温度较低的状态下慢慢进行,否则沉淀相对较多,虽然沉淀并不直接影响血清的质量,但对细胞的显微观察有一定的阻碍。
    3、澄清度
    进口胎牛血清由于蛋白和脂类等物质含量低,表现为稀薄、清淡;国产血清,因为绝大多数是新生牛血清,相对而言更加粘稠,颜色略深,这对于初步接触血清的人很难判断,但把两者进行对比,即可容易分辨。

 

本文来自:试剂仪器网
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