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质粒中量抽提通用型试剂盒
质粒中量抽提通用型试剂盒图片
品牌: 碧云天
参考价格: 286元/盒
包装: 50次
交货期: 一周
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品牌:碧云天
参考价格:286
交货期:一周
产品介绍
产品编号产品名称产品包装产品价格
D0020质粒中量抽提试剂kit盒(通用型)50次286.00元

碧云天的质粒中量抽提试剂kit盒(通用型) (Plasmid Midi Preparation Kit for All Purpose, Plasmid Midiprep Kit for All Prupose)是一种用于从大肠杆菌中进行中量质粒抽提的通用型离心柱式试剂kit盒。
本试剂kit盒不仅适用于常用的EndA-菌株DH5α、JM109和XL-1 e等,也适用于EndA+菌株如JM110、BL21(DE3)、TG1和HB101等,能避免EndA+菌株中高丰度核酸酶的污染,并适用于从糖类修饰水平高的野生菌株中提取质粒。
野生型大肠杆菌中表达Endonuclease I,能切割并降解双链DNA。编码Endonuclease I的基因是endA,如果endA突变失活,其基因型会被标注为endA1,相应的突变菌株被称为EndA-菌株,而野生型菌株则被称为EndA+菌株。常见的EndA-和EndA+菌株参见附表1。从EndA+菌株中抽提的质粒,微量核酸酶和质粒结合而容易被共纯化,导致容易降解,而本试剂kit盒增加了特殊的洗涤步骤(核酸酶洗涤液溶液PB洗涤),可以避免EndA+菌株中抽提获得的质粒容易降解的问题(参考图1)。

图1. 使用溶液PB可以使从EndA+菌株JM110中抽提的质粒不易降解,而对于EndA-菌株DH5α中抽提的质粒没有影响。使用本试剂kit盒时,如上图所示,在使用和不使用溶液PB时的质粒得率一致。但对于EndA+菌株JM110,不使用溶液PB时从其中抽提获得的质粒在内切酶缓冲液Buffer Y中37℃孵育1小时后会全部降解,而使用溶液PB时同样孵育1小时就不会降解。对于EndA-菌株DH5α无论是否使用溶液PB,抽提获得的质粒的都很稳定。

本试剂kit盒采用了一种新型的离子交换柱。在特定条件下,使质粒能在离心过柱的瞬间,结合到质粒纯化柱上,在一定条件下又能将质粒充分洗脱,从而实现质粒的纯化。无需酚氯抽提,无需乙醇沉淀,12个样品只需不足60分钟即可完成。
无需高速冷冻离心机,只需普通台式高速离心机。所有操作均可在1.5ml离心管中完成。
每个质粒纯化柱可以结合的质粒量的上限约为50微克。每个纯化柱可用于抽提5-10毫升用LB培养过夜的大肠杆菌。抽提所得质粒的OD260和OD280比值一般在1.80左右。抽提获得的质粒量会受质粒拷贝数等因素影响。抽提获得的质粒DNA的OD260和OD280比值也会因菌种不同等原因而略有波动。
本试剂kit盒抽提所得到的质粒可直接用于转染细胞,DNA测序,PCR,基于PCR的突变,体外转录,转化tissue,内切酶消化等。本试剂kit盒在使用溶液PB的情况下,获得的质粒的纯度更高,总体上转染细胞的效率会显著提高。
包装清单:

产品编号产品名称包装
D0020-1溶液I (悬浮液)45ml
D0020-2溶液II (裂解液)45ml
D0020-3溶液III (结合液)60ml
D0020-4溶液PB (核酸酶洗涤液)30ml
D0020-5溶液IV (洗涤液)18ml (初次使用前加入27ml)
D0020-6溶液V (洗脱液)8ml
D0020-7RNase A (100mg/ml)45μl
D0020-8中抽质粒纯化柱及废液收集管50套
说明书1份


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