利什曼原虫通用PCR检测试剂盒实验注意事项：

1）RT-PCR可以检测组织、细胞、血液、细菌等很多材料，不同的样本有不同要求，实验前请充分沟通确认实验方案和样本情况；

2）客户尽可能提供实验的背景信息、物种、基因准确的名称和ID号；

3）客户尽量不要提供DNA或RNA样品。

4）样本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

实时荧光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反应体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进程，最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。实时荧光定量PCR的化学原理包括探针类和非探针类两类，探针类是利用与靶细胞序列特异性杂交的探针来指示扩增产物的增加，非探针类是利用荧光染料或者特异性设计的引物来指示扩增的增加。运用该技术可以对DNA、RNA样品进行定量（包括绝对定量和相对定量）和定性分析。

主要服务：DNA或RNA的绝对定量分析、基因表达差异分析、基因分型。

主要技术：引物设计、RNA提取、cDNA合成、qPCR。

PCR反应五要素：

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物： 引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。

产品名称：利什曼原虫通用PCR检测试剂盒

英文名称：Leishmania spp.PCR

编号：GOY-M0604

分类：PCR检测试剂盒

储存条件：-20℃避光保存，避免反复冻融。

运输：低温、避光。

准备物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀释液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

产品说明书                                   1份

它具有下列特点：

1. 一管式操作，用户只需要提供样品即可。

2. 根据大豆热休克蛋白基因保守区域设计引物，能专一性检测出样品中的大豆成分，但不能检测其他非大豆成分。

3. 快速，整个检测过程（按一个样品计）所需时间仅为 2.0 小时。

4. 只需要普通 PCR 仪和凝胶电泳仪，无需配置贵重仪器设备。

5. 对混合样品中大豆成分的检测下限为 0.1%，对样品中大豆成分的核酸检测下限为 1.0ng/μL。

6. 本只能用于科研，足够 50 次 40uL 体系的常规 PCR。

定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 50次Semen persicae桃仁LAMP鉴定试剂盒    负20度 一年24周 低温

定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 50次Radix asparagi天冬LAMP鉴定试剂盒   负20度 一年24周 低温

MSH gamma  促黑细胞激γ体进口/国产ANKRD11  锚蛋白重复结构域蛋白11体

MrpL39  线粒体核糖体蛋白L39进口/国产ANKRD12  锚蛋白重复结构域蛋白12体

MSH2  错配修复蛋白2体进口/国产ANKRD13A  锚蛋白重复结构域蛋白13A体

MSH6  错配修复蛋白6体进口/国产ANKRD9  锚蛋白重复结构域蛋白9体

MSK1/RPS6KA5  有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1体进口/国产APM2  脂肪特定转录因子2体

PhosphoMSK1 (Ser360)  化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1体进口/国产ANKS1A  锚蛋白重复及SAM结构域蛋白1A体

PhosphoMSK1 (Ser212)  化有丝分裂原和应激活化型蛋白激酶1体进口/国产APOL3  载脂蛋白L3体
利什曼原虫通用PCR检测试剂盒水闸蛋白14检测试剂盒10mg

 人肝细胞香菇属 Lentinula sp.

5胞嘧啶  质量>98%,BR 5methylcytosine

 THP1人单核白血病细胞香菇 Lentinula edodes

7喜树(标准品) 质量HPLC>98%,标准品 7Ethylcamptothecin

 苏云金芽孢杆 Bacillus thuringiensis藤黄微球 Micrococcus luteus

()Blebbistatin 质量>98% ()Blebbistatin

 鼠李糖杆 Lactobacillus rhamnosus293FT(人胚肾细胞)

7喜树 质量>98%,BR 7Ethylcamptothecin

 SF126(人瘤细胞)苜蓿中华根瘤

达铂;顺糖铂 质量>98%,BR Nedaplatin

 沟肠杆 Enterobacter cloacaeRaw264.7, 小鼠单核巨噬细胞白血病细胞

SB 203580 质量>98%,p38 MAPK抑制 SB203580

 葡萄孢 Botrytis sp.嗜热链球 Streptococcus thermophilus

63呤(3MA)；细胞自噬抑制 质量HPLC≥97%,autophagy inhibitor 3MA;6Amino3methylpurine

 黑化大家鼠肺成纤维样细胞绿色木 Trichoderma viride

黄呤；2,6二羟呤； 质量>99%,BR 2,6Dihydroxypurine；Xanthine
设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。

②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。

③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC好随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3’端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。

⑤引物3’端的碱基，特别是zui末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。

⑥引物中有或能加上合适的酶切位点，被扩增的靶序列zui有适宜的酶切位点，这对酶切分析或分子克隆很有好处。

⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。