胆固醇氧化酶（COD）是胆固醇降解代谢过程中的关键酶。它依赖于辅酶 FAD，能催化胆固醇氧化和异构化生成胆甾-4-烯-3-酮，同时产生H2O2。近些年来，胆固醇氧化酶在不同领域都发挥着它的价值。我带大家了解的是关于胆固醇氧化酶在临床检测中的一些用途。

胆固醇氧化酶可以用来检测多种样品中的胆固醇含量：

（a）全血清和其血清；

（b）低密度脂蛋白和高密度脂蛋白；

（c）红细胞膜、其他细胞膜；

（d）胆结石和人体胆汁。

1973 年，Richmond 发现可以通过测定诺卡氏菌中的胆固醇氧化酶催化胆固醇氧化生成的H2O2的量来测定血清中胆固醇水平。H2O2可以与四价钛和二甲酚橙反应生成在550 nm有吸收的有色物质。后来又通过测定胆固醇氧化酶作用下生成的胆甾-4-烯-3-酮（在 240 nm 有最大吸收）的量测定血清胆固醇。

由于人体血浆中70%的胆固醇是以酯化的形式存在的，胆固醇酯酶也被应用到血浆总胆固醇的测定中。胆固醇酯酶水解胆固醇酯生成游离胆固醇；胆固醇氧化酶作用于胆固醇生成胆甾酮和过氧化氢;在辣根过氧化物酶的作用下，过氧化氢能将 4-氨基-安替比林和苯酚转化为红色的亚醌类化合物，该化合物在500 nm处有最大吸收峰，通过检测紫外吸收强度就能够测定胆固醇的含量。这个方法具有简单、干扰少、重现性好的优点，通常将胆固醇氧化酶、胆固醇酯酶和过氧化氢酶混合在一起，制成测量血清总胆固醇含量的诊断试剂盒，用于临床检验中。但是，由于色素的干扰，胆汁中的胆固醇不能用此比色法检测，而要通过电化学方法测定胆固醇氧化所消耗的氧气量。

为了提高胆固醇利用率和稳定性，常将胆固醇固定化，制成传感器的形式。通过测定氢敏染料的荧光度变化检测胆固醇水平。这个方法的分析范围在0.2-3 mM，在7-12 min 能够得到稳定信号。

之后，又制作了一个基于氧气的电化学还原的生物传感器，它采用了双层镀膜的方式，将胆固醇氧化酶固定于尼龙网上，置于氧探头膜之上或者过氧化氢检测器的醋酸纤维素膜之上，上方再覆盖一层聚碳酸脂膜。在流动注射系统中，在0.5-5 mM 的胆固醇浓度范围内，这个检测器能够迅速给出准确、重现性好的结果，且不会受有机干扰的影响。