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白细胞介素23(IL-23)ELISA检测试剂盒
白细胞介素23(IL-23)ELISA检测试剂盒图片
包装: 96T
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产品别名:白介素-23 ELISA检测试剂盒
IL-37/IL1F7 ELISA Kit
产品介绍
订货号产品名称规格价格
E-IL37-Ch-1鸡白细胞介素23(IL-23)ELISA检测试剂盒96T
E-IL37-H-1人白细胞介素23(IL-23)ELISA检测试剂盒96T
E-IL37-B-1牛白细胞介素23(IL-23)ELISA检测试剂盒96T
E-IL37-G-1山羊白细胞介素23(IL-23)ELISA检测试剂盒96T
E-IL37-Mu-1小鼠白细胞介素23(IL-23)ELISA检测试剂盒96T
E-IL37-Rt-1大鼠白细胞介素23(IL-23)ELISA检测试剂盒96T

检测原理:

白细胞介素23(IL-23)ELISA检测试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附检测方法。向预包被了抗体的微孔板中,加入标准品和待测样本,温育后,加入生物素标记抗体和过氧化物酶标记的链霉亲和素。经过温育和洗涤结合形成的免疫复合物,去除未结合的酶,然后加入显色底物TMB。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的待测因子浓度呈正相关。最后,在450 nm处测定反应孔样品吸光度(OD)值,通过绘制标准曲线计算出样本待测因子的浓度。


适用样本:

血清、血浆、细胞培养上清液和组织等。


实验方法:

双抗夹心法。


产品别名:

IL37;FIL1;FIL1(ZETA);FIL1Z;IL-1F7;IL-1H;IL-1H4;IL-1RP1;IL-23;IL-37;IL1F7;IL1H4;IL1RP1;interleukin 37;interleukin-37;FIL1 zeta;IL-1 zeta;IL-1F7b (IL-1H4, IL-1H, IL-1RP1);IL-1X protein;IL1F7 (canonical product IL-1F7b);interleukin 1 family member 7;interleukin 1, zeta;interleukin-1 homolog 4;interleukin-1 superfamily z;interleukin-1-related protein;interleukin-23;白细胞介素23(IL-23);白细胞介素37(IL-37);白介素37(IL-37);白介素23(IL-23);白介素23;白细胞介素23;白细胞介素37;白介素-23(IL-23);白介素-23


白细胞介素23是一种由IL12B(IL-12p40)亚单位(与IL12共享)和IL23A(IL-23p19)亚单位组成的异质二聚体细胞因子。IL-23的功能性受体(IL-23受体)已被确定,由IL-12R β1和IL-23R组成。Adnectin-2与IL-23结合并与IL-23/IL-23R竞争。IL-23R在结合IL-23的域中有一些单核苷酸多态性,因此在激活Th17方面可能存在差异。IL-23已被证明是Th17维持和扩张的关键细胞因子。IL-6和TGF-β激活Th17转录因子RORγt,使Th17极化。IL-23稳定RORγt,从而使Th17能够正常运作并释放其效应细胞因子,如IL-17、IL-21、IL-22和GM-CSF,这些细胞因子可介导对细胞外寄生虫(真菌和细菌)的保护并参与屏障免疫。IL-23主要由活化的树突状细胞、巨噬细胞或单核细胞分泌。先天性淋巴细胞和γ-δT细胞也产生IL-23。B细胞通过BCR信号产生IL-23。IL-23的分泌被模式识别受体识别的抗原刺激所刺激。树突状细胞表达的IL-23被胸腺基质淋巴细胞生成素进一步诱导--这是一种由角质细胞表达的促过敏性细胞因子,在银屑病病变中升高。因此,通过减少树突状细胞的激活,从而减少IL-23,抑制这种细胞因子可以成为银屑病患者的潜在治疗选择。皮肤树突状细胞与痛觉神经元接触,如果用药物取消它们,就不会有树突状细胞产生IL-23。如果没有IL-23,银屑病患者的皮肤中也不会有炎症细胞。细菌性脑膜炎期间,IL-23也会升高。这种分泌使上皮细胞失调,出现炎症。

试剂盒组分

    ELISA酶标板、标准品、生物素化抗体、浓缩HRP酶结合物、酶结合物稀释液、生物素化抗体稀释液、标准品&样品稀释液、浓缩洗涤液、底物溶液(TMB)、反应终止液、封板覆膜


需自备物品

    1.酶标仪(450nm检测波长滤光片,570nm或630nm校正波长滤光片) ;

    2.洗板机(可调注液量,保证每孔350μl洗液而不溢出);

    3.高精度单道加液器;

    4.高精度多道加液器;

    5.37℃恒温箱;

    6.低温离心机;

    7.纯净水或蒸馏水。


操作步骤

    1.从已平衡至室温的密封袋中取出试验所需板条,未用的板条和干燥剂请放回铝箔袋内封存于2-8℃;

    2.分别将标本或不同浓度的标准品加入相应孔中(100μl/孔), 37℃孵箱孵育90分钟;

    3.弃掉板内液体,洗板2次;

    4.加入生物素化抗体工作液(100μl/孔),37℃孵箱孵育60分钟;弃掉板内液体,洗板3次;

    5.除空白孔外,加入酶结合物工作液(100μl/孔)。37℃孵箱,避光孵育30分钟;弃掉板内液体,洗板5次

    6.加入TMB显色工作液(包括空白孔)100μl/孔,37℃孵箱,避光孵育,当标准曲线高浓度的颜色较深,有明显的颜色梯度的时候,即可终止。试验显色反应请勿超过30分钟;

    7.加入终止液(包括空白孔)100μl/孔,混匀后即刻测量OD(450nm)值(10分钟内)。

    8.计算标本待测因子含量。


注意事项

    1.试剂盒使用前请保存在2-8℃。除复溶后的标准品,其他成分不可冻结。

    2.浓缩生物素化抗体,浓缩酶结合物体积小,运输中颠簸和可能的倒置,会使液体沾到管壁或瓶盖。因此使用前请用手甩几下或1000rpm离心1分钟,以使附着管壁或瓶盖的液体沉积到管底。

    3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,使结晶完全溶解后再配制洗涤液。

    4.实验过程中,冻干标准品为一次性使用,不得分装。因其浓度较低,溶解两小时候后,会迅速失活。

    5.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。

    6.配制试剂时,要用旋涡混合仪混匀。加入孔内的试剂,充分混匀对测试结果尤为重要,最好使用微量振荡器(使用最低频率),如无微量振荡器,可在反应前手工轻轻晃动酶标板1分钟,例如做圆周动作,使加入孔中的反应液混匀。

    7.实验用酶标仪应严格按使用说明书规范操作,并在使用前充分预热。

    8.酶免实验中标准品和样本检测时建议作复孔。

    9.将不用的微孔板放进原铝箔袋中,置2-8℃保存。

    10.显色液对光敏感,因此要避免直接暴露在光线下。

    11.超过使用有效日期的试剂盒不能应用于实验中。

    12.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,波长应该设置为450nm和630nm.

    13.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按生物废弃物处理。终止液为2M硫酸,使用时必须注意安全。

    14.各步骤加样均应使用加样器,并经常校准其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。

    15.每次试验测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔最高浓度的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数。

    16.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。

    17.以洗板机洗板时,每孔注液量不应少于350μl, 注意检查加样头是否堵塞。手工洗板时, 用带纸屑的吸水材料应慎重, 防止外源性过氧化物酶类似物或氧化还原物与显色剂发生反应。

    18.用终止液终止反应后,请于10分钟内读取OD值。

    19.进行复孔实验时,结果计算一定要求平均值。

    20.标本溶血可能会有假阳性结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。

    21.试验时,应该将加过样品的板条放于密闭盒内,并保持湿度约60%左右;

    22.为保证恒温箱内的温度为37℃,恒温箱的温度要经常校准。以确保实验温度保持恒定。    

精密度

    批间差:CV%<10%;批内差:CV%<8%

储存

    -20℃,短期4℃

有效期

    12个月

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