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土壤过氧化物酶(S-POD)活性检测试剂盒(微量法)
产品介绍 注意:正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定。 S-POD主要来源于土壤微生物,能够氧化土壤有机物质产生过氧化物,在腐殖质的形成过程中具有重要作用。 S-POD催化有机物质氧化成醌,后者在430nm有特征光吸收。 产品内容: 试剂一:粉剂×1瓶,临用前每瓶加入10ml蒸馏水,用不完的试剂仍4℃保存; 试剂二:液体2ml×1瓶,4℃保存; 试剂三:液体5ml×1瓶,4℃保存; 试剂四:乙醚50ml×1瓶,4℃保存;(自备) 标准品:液体10ml×1瓶,4℃保存,相当于每ml乙醚相中含有0.1mg/ml紫色没食子素。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、乙醚(不允许快递)、研钵、冰和蒸馏水。 操作步骤: 1、样品处理:新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30-50目筛。2、标准品处理:将标准品用0.5 mol/L HCl溶液稀释至0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0.01、0mg/ml。分光光度计预热30min以上,调节波长至430nm,0mg/ml管调零,测定标准管的吸光度,根据吸光度(x)和浓度(y)建立标准曲线。 3、测定步骤:
根据标准曲线,将△A(x)带入公式中计算出y值(mg/ml)。 单位的定义:每天每g土样中产生1mg紫色没食子素定义为一个酶活力单位。 S-POD活力(U/g土样)=y×V提取相÷W÷T=516×y T:反应时间,1h=1/24d;V提取相:提取相总体积0.43ml;W:样本质量,0.02g。 注意事项: 每个样品均需做无基质管。 |
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