Hg²⁺是水体中重要有毒重金属离子，易被生物体吸收并且积累，能够通过食物链进一步传递，从而造成伤害。典型的水俣病就是汞中毒的一种。

水样经消化后，在酸性环境中，Hg²⁺能与双硫腙生成橙色络合物，溶于三氯甲烷，在490nm测定吸光度，即可计算Hg²⁺含量。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

产品组成：

溶液的配制：

1.试剂一：临用前加入2ml蒸馏水溶解；

2.试剂四：临用前加入5ml蒸馏水充分溶解待用；

3.试剂五：加三氯甲烷(自备)50ml充分溶解；

4.标准品：4000nmol/mlHg²⁺，临用前用水稀释400倍即10nmol/ml标准溶液。

需自备的仪器和用品：

台式离心机、可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、微量玻璃比色皿/96孔板(非聚丙烯/聚苯乙烯材质)、可调式移液枪、浓硫酸、浓硝酸、三氯甲烷(氯仿)、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理(可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献)

每采集1000ml水样后立即加入7ml硝酸，调节每个样本的pH，使之低于或等于1。若取样后不能立即测量，向每升样本中加入试剂二4ml或更多，使之呈现持久的淡红色。

二、测定步骤

1.可见分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至490nm，氯仿调零。

2.操作表(在1.5mlEP管中分别加入)：

三、汞离子浓度计算

Hg²⁺(nmol/ml)=C标准品×ΔA测定÷ΔA标准=10×ΔA测定÷ΔA标准

C标准品：标准品浓度，10nmol/ml。

注意事项：

1.水样中 1000μg/L铜离子，20μg/L银离子，10μg/L金离子，5μg/L铂离子对测定无干扰。

2.测定过程中应注意安全，佩戴口罩和手套，以免吸入或沾到有毒及危险试剂。

3.当吸光度大于 0.6时，建议用蒸馏水稀释后测定。

4.含悬浮物和(或)有机物较少的水可把加热时间缩短为 1h，不含悬浮物的较清洁水可把加热时间缩短为 30min。

5.若消化过程中样本管上层溶液变透明，可以适当加入试剂二使样本管保持粉红或黑紫色。

6.若加入的试剂三不足以使样本管变澄清，可以适当增加试剂三的加入量来使样本管变澄清。

7.若加入试剂六后，下层有机相仍呈现很明显的绿色，可以适当增加试剂六的加入量来使下层有机相变浅。

8.聚丙烯/聚苯乙烯材质易溶于氯仿等有机试剂。