注意：正式测定之前选择 2-3 个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：

β-木糖苷酶(EC3.2.1.37)存在于植物、细菌和真菌等生物体，是催化木聚糖类半纤维素降解的关键酶，产物木糖可作为碳源应用于微生物发酵。另外，β-木糖苷酶还可以作为生物漂白剂应用于造纸工业，比传统的漂白法环保，具有广泛的应用价值。

测定原理：

4-羟甲基-7-香豆素(MUB)在 365  nm波长处激发,能在 470 nm处检测到荧光,它与某些物质结合后荧光特性消失,通过酶的水解作用 MUB释放出来，通过检测荧光量来表征酶活性。

自备仪器和用品：多功能酶标仪、恒温培养箱、分析天平、可调式移液器、冰、蒸馏水。

试剂组成和配制：

试剂一：液体 120mL×1瓶，4℃保存。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。用前加 11 mL蒸馏水充分溶解。

试剂三：液体 10mL×1瓶，4℃保存。

粗酶液提取：

新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干，过 30～50目筛。按照土壤质量(g)：试剂一 mL)为 1：5～10的比例(建议称取约 0.1g土壤，加入 1mL试剂一)，振荡混匀。

测定步骤：

1.测定管：在震荡条件下取 100  μL土壤悬液到 EP管中，加入 100 μL试剂二，30℃震荡避光培养 3 h，从中吸取 134  μL到黑色不透光 96孔板中，加入 66 μL试剂三后用多功能酶标仪进行检测，激发光波长 365 nm，测定波长 470nm。

2.对照管：取 100 μL蒸馏水到 EP管中，加入 100 μL试剂二，30℃震荡避光培养 3 h，从中吸取 134 μL到黑色不透光 96孔板中，加入 66  μL试剂三后用多功能酶标仪进行检测，激发光波长 365 nm，测定波长 470nm。 ΔA=A测定-A对照

注意：对照管只需测定一次。

土壤β木糖苷酶活性计算公式：

标准曲线：y = 62629x - 2266.4     R² = 0.9996     x：MUB标准品浓度(nmol/mL)

y：荧光强度酶活(nmol/h/g土样)=(ΔA+2266.4)÷62629×V÷T÷W=(ΔA+2266.4)÷187887÷W

V：提取液体积，1 mL；W：土壤样品质量，g；T：催化反应时间，3 h。