测定原理:
氧化型细胞色素b5经连二亚硫酸钠还原后,在424nm处有最大吸收,通过测定424nm和490nm的吸光度差异即可计算出细胞色素b5的含量。
仪器设备:
可见分光光度计、普通离心机、高速离心机、可调式移液器、1ml玻璃比色皿、蒸馏水。
试剂组成(50T/48 样)
试剂一:粉剂×1 瓶,4°C保存。临用前加100ml蒸馏水,充分溶解。
试剂二:液体×1 瓶,4°C保存。
试剂三:粉剂×1 瓶,4°C保存。
工作液配制:戴一次性手套小心打开试剂三瓶盖,加试剂二50ml充分溶解,4°C避光可保存一周。
操作步骤:
1、样本提取:详见试剂盒内说明书。测定细菌、组织和细胞时需要测定蛋白浓度。
2、操作表:
试剂名称 | 测定管 | 空白管 |
蒸馏水(μl) |
| 50 |
待测液(μl) | 50 |
|
工作液(μl) | 1000 | 1000 |
室温静置2分钟,424nm读A1,490nm读A2