支链淀粉含量测试盒(微量法)
产品介绍
正式测定前务必取 2-3 个预期差异较大的样本做预测定 测定意义: 支链淀粉是具有高度分支的多糖,淀粉中直链淀粉和支链淀粉的比例和含量对淀粉产品的加工、物化特性、糊化温度等有着直接的影响,对于不同比例直、支链淀粉的淀粉的研究具有重要的意义。 测定原理: 利用 80%乙醇可以把样品中可溶性糖与淀粉分开,利用双波长比色法测定支链淀粉含量。 需自备的仪器和用品: 酶标仪/可见分光光度计、水浴锅、可调式移液器、96 孔板/微量石英比色皿、研钵、冰、乙醚和蒸馏水。 试剂的组成和配制: 试剂一:液体 100mL×1 瓶;4℃保存; 试剂二:乙醚 100mL×1 瓶;4℃保存;(自备) 试剂三:液体 100mL×1 瓶;4℃保存; 试剂四:液体 2mL×1 瓶; 4℃保存; 试剂五:液体 300uL×1 瓶; 4℃保存; 淀粉提取: 称取 0.01~0.02g 烘干样本(建议称取约 0.01g)于研钵中研碎,加入 1mL 试剂一,充分匀浆后转移到 EP 管中,80℃水浴提取 30min,3000g,25℃离心 5min,弃上清,留沉淀,加入1mL 试剂二(乙醚)振荡 5min,3000g,25℃离心 5min,弃上清,留沉淀,加入 1mL 试剂三充分溶解,90℃水浴 10min,冷却后待测。 测定步骤: 1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上,蒸馏水调零。 测定管:在 96 孔板或微量石英比色皿中依次加入 20uL 样本, 14uL 试剂四,120uL 蒸馏水,2uL 试剂五,44uL 蒸馏水,混匀,分别测定 550 和 743nm 处吸光值,ΔA 测定=A550-A743。 空白管:在 96 孔板或微量石英比色皿中依次加入 20uL 试剂三, 14uL 试剂四,120uL 蒸馏水,2uL 试剂五,44uL 蒸馏水,混匀,分别测定 550 和 743nm 处吸光值,ΔA 空白=A550-A743。 支链淀粉含量计算: a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下标准条件下测定的回归方程为 y=0.1214x+0.0076;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。 1、按照蛋白浓度计算 支链淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076)×V1]÷0.1214 ÷(V1×Cpr)=8.24×(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076)÷Cpr 2、按样本干重计算 支链淀粉含量(mg/g 干重)= [(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076)×V1]÷0.1214÷(W×V1÷V2) =8.24×(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076)÷W V1:加入反应体系中样本体积,0.02mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g b.用 96 孔板测定的计算公式如下标准条件下测定的回归方程为 y= 0.0607x+0.0076;x 为标准品浓度(mg/mL),y 为吸光值。 1、按照蛋白浓度计算 支链淀粉含量(mg/mg prot)=[(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076)×V1]÷0.0607÷(V1×Cpr)=16.47×(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076)÷Cpr 2、按样本干重计算 支链淀粉含量(mg/g 干重)= [(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076)×V1]÷0.0607÷(W×V1÷V2) =16.47×(ΔA 测定-ΔA 空白-0.0076)÷W V1:加入反应体系中样本体积,0.02mL;V2:加入提取液体积,1 mL;Cpr:样本蛋白质浓度,mg/mL;W:样本质量,g 最低检测限为 10mg/g 干重或 0.1mg/mgprot。 用户评论 产品评分 目前评分共0人 产品质量
售后服务
易用性
性价比
|
同品牌产品:
相关产品:
|