自备仪器和用品: 分光光度计、离心机、移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏
产品名称:乙酰辅酶A含量试剂盒价格
产品货号:GOY-016590
检测方法:紫外分光光度法 紫外分光光度法 微板法
产品规格: 24样 48样 96样
产品分类:呼吸代谢途径系列
测定步骤:产品仅用于科研
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至450nm,蒸馏水调零。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入250μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项
1、试剂三为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
对照管的范围是0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂三活性低,可以适当减少稀释倍数;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂三未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
使用说明:
样品的准备:
细胞样品的准备:对于贴壁细胞,吸净细胞培养液,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍,按照每100万细胞加入100~200μL的比例加入本试剂盒提供的SOD样品制备液,适当吹打以充分裂解细胞;对于悬浮细胞,600g离心5分钟收集细胞,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍,按照每100万细胞加入100~200μL的比例加入SOD样品制备液,适当吹打,以充分裂解细胞。4℃约12000g离心3~5分钟,取上清作为待测样品。
组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl,含有0.16mg/ml肝素钠)灌流清除血液后获取组织样品。取适量的组织样品,按照每10mg组织加入100μL SOD样品制备液的比例在4℃或冰浴进行匀浆(可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器)。4℃约12000g离心3~5分钟,取上清作为待测样品。
血浆或红细胞样品的准备:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。4℃ 600g离心10分钟,移取上清至另一新的1mL离心管中,适量生理盐水稀释后即可作为血浆样本进行检测。红细胞样品可以参考步骤1a悬浮细胞样品的制备方法,或其它不含Triton X-100等去垢剂的样品制备方法。
上述样品准备完毕后可以用百奥莱博生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。通常10~20μg蛋白的细胞或组织匀浆液样品中的SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考)。每种样品准备20~100μg蛋白量通常已经足够用于后续检测。 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用本试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏组织10%匀浆液(组织和匀浆液的重量比为1:10)上清,通常需要稀释10~100倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
犬肾细胞;MDCK/IgRDL-甲硫氨酸;蛋氨酸质量规格:>99%,BRDL-Mine
RK3 Others Human kC / RK3 细胞裂解液 (阳性对照) DL-天冬氨酸质量规格:0.98DL-Aspartic acid
CL-0264C918(眼脉络色素瘤细胞)5×106cells/瓶×2DL-谷氨酰胺质量规格:>98%,BRDL-Glutamine
HA Others H4N8 甲型流感 H4N8 (A/chicken/Alabama/1/1975) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 细胞裂解液 (阳性对照) DL-beta-苯丙氨酸(>98%,BR)质量规格:>98%,BRDL-beta-Phenylalanine
小鼠上皮细胞完全培养基 100mLDL-肉碱盐酸盐质量规格:>98%,BRDL-Carnitine
4,5-二氟酞腈(>95.0%(GC)) 4,5-Difluorophthalonitrile 质量规格:>95.0%(GC) 大鼠热休克蛋白27(HSP-27)ELISA检测试剂盒Ratheatshockprotein27,HSP-27ELISAKit 96T/48T
4-己氧基苯二甲腈(>95.0%(GC)) 4-Hexyloxyphthalonitrile 质量规格:>95.0%(GC) 人白介素12(IL-12/P70)试剂盒 Human Ierleukin 12,IL-12/P70 ELISA KIT
4-羟基邻苯二甲腈(>97.0%(GC)) 4-Hydroxyphthalonitrile 质量规格:>97.0%(GC) 英文名称MouseInhibinAELISAKit小鼠抑制素A(INHA)规格:96T/48T
4-硝基邻苯二甲腈(>98.0%(GC)) 4-Nitrophthalonitrile 质量规格:>98.0%(GC) pLKO.1-C+siRNA慢病毒(siRNA)
3-硝基邻苯二甲腈(>98.0%(GC)) 3-Nitrophthalonitrile 质量规格:>98.0%(GC) Rabbitacetylcholine,ACHELISA试剂盒兔乙酰胆碱(ACh)ELISA试剂盒规格:96T/48T
邻苯二甲腈(>99.0%(GC)) Phthalonitrile 质量规格:>99.0%(GC) 小鼠低密度脂蛋白受体相关蛋白1(LRP1)ELISA试剂盒 ,英文名: LRP1 ELISA Kit
4-丙氧基苯二甲腈(>95.0%(GC)) 4-Propoxyphthalonitrile 质量规格:>95.0%(GC) 人α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)ELISA检测试剂盒Humanα-Smoothmuscleactin,α-SMAELISAKit 96T/48T
4-戊氧基苯二甲腈(>98.0%(GC)) 4-Pentyloxyphthalonitrile 质量规格:>98.0%(GC) 大鼠柠檬酸合酶(CS)试剂盒 Rat Ciate syhase,CS ELISA Kit
四氟邻苯二甲腈(>98.0%(GC)) Tetrafluorophthalonitrile 质量规格:>98.0%(GC) 英文名称RatPTHELISAKit大鼠甲状旁腺激素(PTH)ELISAKit规格:96T/48T
1,2-萘二甲腈(>98.0%(GC)) 1,2-Naphthalenedicarbonitrile 质量规格:>98.0%(GC) 酵母果胶甲酯酶(pectinmethylesterase;PME)活性比色法定量检测试剂盒20
乙酰辅酶A含量试剂盒价格人肾上腺髓质素前体(Pro-ADM)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:Pro-ADM Human Pro-ADM(Proadrenomedullin) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组Pro-ADM浓度