产品名称:抗坏血酸氧化酶(AAO)试剂盒说明书
产品货号:GOY-016373
检测方法:紫外分光光度法 微板法
产品规格: 48样 96样
产品分类:ASA-GSH循环系列
自备仪器和用品: 分光光度计、离心机、移液器、1ml玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏
测定步骤:
1、 分光光度计预热30min以上,调节波长至450nm,蒸馏水调零。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入250μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定充分混匀,室温静置30min后,450nm处测定各管吸光值A。
注意事项
1、试剂三为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?
对照管的范围是0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂三活性低,可以适当减少稀释倍数;(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间30min可以延长到40min)。对照管吸光值过高可能是试剂三未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释10倍后再测,通常可以使测定正常。计算公式中乘以相应稀释倍数。
星形细胞生长添加物SteCGS褪素-d4质量规格:美国进口Melatonin-d4
TNFSF9 Others Rat 大鼠 4-1BBL / CD137L / TNFSF9 细胞裂解液 (阳性对照) 盐酸美法仑质量规格:美国进口Melphalan
大鼠肺微血管内皮细胞完全培养基 100mL7-单一去甲基米诺环素质量规格:美国进口7-Monodemethyl Minocycline
A9细胞,小鼠皮下结缔组织细胞 HCC1428(癌细胞) 非洲绿猴肾细胞系/HCV-C;Vero-HCV-C9-单一去甲基米诺环素质量规格:美国进口9-Monodemethyl Minocycline
表皮生长因子罗哌卡因-d7质量规格:美国进口Ropivacaine-d7
人纤维胶凝蛋白3(FCN3)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:FCN3, FCNH, HAKA1, ficolin 3, Collagen/fibrinogen domain-containing lectin 3 p35, Collagen/fibrinogen domain-containing protein 3, Hakata antigen Human FCN3(Ficolin 3) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组FCN3浓度
人胸腺激活调节趋化因子(TARC)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:CCL17, ABCD-2, SCYA17, A-152E5.3, Small Inducible Cytokine Subfamily A(Cys-Cys) Member 17 Human TARC(Thymus Activation Regulated Chemokine) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组TARC浓度
人X组磷脂酶A2(PLA2G10)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:GXPLA2, GXSPLA2, SPLA2 Human PLA2G10(Phospholipase A2, Group X) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组PLA2G10浓度
抗坏血酸氧化酶(AAO)试剂盒说明书人白介素22(IL-22)酶联免疫吸附测定试剂盒 别称:IL22, IL-D110, IL-TIF, ILTIF, TIFIL-23, TIFa, zcyto18 Human IL-22(Interleukin 22) ELISA Kit 用途 该试剂盒用于体外定量检测Human 血清,血浆或其他生物体液中天然及部分重组IL-22浓度
使用说明:产品仅用于科研
样品的准备:
细胞样品的准备:对于贴壁细胞,吸净细胞培养液,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍,按照每100万细胞加入100~200μL的比例加入本试剂盒提供的SOD样品制备液,适当吹打以充分裂解细胞;对于悬浮细胞,600g离心5分钟收集细胞,用4℃或冰浴预冷的PBS或生理盐水洗涤一遍,按照每100万细胞加入100~200μL的比例加入SOD样品制备液,适当吹打,以充分裂解细胞。4℃约12000g离心3~5分钟,取上清作为待测样品。
组织样品的准备:动物用生理盐水(0.9% NaCl,含有0.16mg/ml肝素钠)灌流清除血液后获取组织样品。取适量的组织样品,按照每10mg组织加入100μL SOD样品制备液的比例在4℃或冰浴进行匀浆(可以使用玻璃匀浆器或各类常见电动匀浆器)。4℃约12000g离心3~5分钟,取上清作为待测样品。
血浆或红细胞样品的准备:用抗凝管收集血液,颠倒混匀。4℃ 600g离心10分钟,移取上清至另一新的1mL离心管中,适量生理盐水稀释后即可作为血浆样本进行检测。红细胞样品可以参考步骤1a悬浮细胞样品的制备方法,或其它不含Triton X-100等去垢剂的样品制备方法。
上述样品准备完毕后可以用百奥莱博生产的BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度。通常10~20μg蛋白的细胞或组织匀浆液样品中的SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考)。每种样品准备20~100μg蛋白量通常已经足够用于后续检测。 根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用本试剂盒提供的SOD检测缓冲液适当稀释样品。例如,小鼠肝脏组织10%匀浆液(组织和匀浆液的重量比为1:10)上清,通常需要稀释10~100倍。准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-70℃冻存,但建议尽量当天完成测定。