产品组分
| P2061 | | |
| 2×Long Taq Mix | 1 ml | 1支 |
| PCR Enhancer | 0.5 ml | 1支 |
| 超纯水 | 1ml | 1支 |
| P2062 | | |
| 2×Long Taq Mix | 1ml | 1支×3 |
| PCR Enhancer | 0.5 ml | 1支×3 |
| 超纯水 | 1ml | 1支×3 |
注：本产品分含体系中包含溴酚蓝、不含溴酚蓝两类。体系中包含溴酚蓝的产品，PCR扩增产物可直接电泳检测。这两类产品的扩增性能无差异。如没特别说明提供体系中包含溴酚蓝的包装。
保存条件
-20℃保存2年。
请勿保存于-70℃，防止反复冻融导致酶活降低。
产品说明
Long Taq Mix是2×浓缩的PCR扩增预混和溶液，含有Long Taq DNA聚合酶、dNTPs、缓冲液等PCR扩增必需组分(模板与引物除外)。使用时，仅需在扩增体系中加入模板和引物即可进行PCR，大大简化操作过程，缩短操作时间，降低污染(加样次数减少)。同时，由于体系内含有优化剂与增强剂，能够显著增强PCR扩增的灵敏度。
LongTaq DNA聚合酶的保真性是Taq DNA聚合酶的3倍，简单模板的扩增长度可达40 kb。在扩增复杂模板(如GC-rich或重复序列)时，LongTaq DNA聚合酶的扩增效率显著高于Taq DNA聚合酶，特别适合复杂模板的PCR扩增。扩增产物具有两种末端：平末端与3'-dA突出末端。
产品特点
使用方便：仅需加入模板和引物即可进行PCR扩增。
快速、高效：减少加样步骤，节约时间。
可重复：降低污染和加样错误风险。
产品用途
长链复杂模板PCR扩增
高通量、高重复性长链复杂模板PCR扩增
活性定义
一个活性单位(U)指用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物，在72℃、30 min内，摄入10 nmol全核苷酸所需的酶量。
质量控制
相关测试表明无外源内切酶或外切脱氧核糖核酸酶、核糖核酸酶污染；PCR方法检测无宿主残余DNA，能有效扩增人基因组中的单拷贝基因；室温放置一周，扩增活性无明显改变。
2×Long Taq Mix的组分
100 mM KCl
20 mM Tris-Cl
3 mM MgCl2
400 mM dNTPs
0.1 U/μl PlusTaq DNA聚合酶
溴酚蓝等
应用举例
注：以下反应举例为50 μl标准PCR体系，仅供参考。实际PCR条件应根据模板、引物结构、目的片段大小加以优化，确定最佳反应条件。
以λDNA为模板，扩增10kb片段。
| λ DNA(2.5 ng/μl) | 1 μl |
| Primer 1(10 μM ) | 2 μl |
| Primer 2(10 μM) | 2 μl |
| 2× LongTaqMix | 25 μl |
| dd H2O | 补足至50 μl |
反应条件
| 95℃ | 2 min |
| 95℃ | 30 sec |
| 55~68℃ | 30 sec 30 Cycles |
| 72℃ | 8 min |
| 72℃ | 5 min |
备注
1、建议在冰上配置PCR 反应液后，再放入PCR仪中进行扩增。这有利于提高扩增的特异性，减少非特异性扩增，得到良好的PCR结果。
2、Long Taq Mix的扩增产物有两种末端：平末端和3'-dA突出末端。要提高克隆效率，建议PCR产物纯化后，加A再进行TA克隆。
3、模板DNA推荐用量(50 μl PCR反应体系)
| 人类基因组DNA | 0.1 – 1 μg |
| λDNA | 0.5 – 5 ng |
| 质粒DNA | 0.1 – 10 ng |
| 大肠杆菌DNA | 10 – 100 ng |
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