猪高致病性蓝耳病毒RT-PCR检测试剂盒
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产品介绍
组成及试剂配制: 1、酶标板:一块(96孔) 2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 3、 样品稀释液:1×20ml。 4、 检测稀释液A:1×10ml。 5、 检测稀释液B:1×10ml。
规格:50T 储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。 运输:低温、避光。 有效期:一年 货期:现货PCR试剂盒的有效期一般为1年,这是指在适当的储存温度下。核酸扩增部分的试剂一般要贮存于-20℃下,产物检测部分试剂则贮存于2-8℃。尽量避免反复冻融。 【结果分析条件设定】 u 基线(Baseline)设定:应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域(所有样本荧光信号无较大波动),起始点(Start)应避开荧光采集起始阶段的信号波动,终止点(End)应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环,建议基线设为6~15。 u 阈值(Threshold)设定:将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。 【质控标准】 1. 阴性质控品的检测结果应为阴性,无指数扩增期,Ct=40或无Ct; 2. 阳性质控品的检测结果应为阳性,有明显的指数扩增期,Ct值应小于等于35; 3. 以上要求需在一次实验中同时满足,否则该次实验视为无效。 【结果判断】 1. 阳性:有明显的指数扩增期,且Ct<38; 2.可疑:有明显的指数扩增期,且38≤Ct<40,此时样本为可疑样本;对于可疑样本建议复核一次,若复核结果Ct<40且有指数扩增期,则判定为阳性,否则判定为阴性; 3. 阴性:无指数扩增期,Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。 【对检验结果的解释】 1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果; 2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,可能会导致出现假阴性结果。 猪高致病性蓝耳病毒RT-PCR检测试剂盒PCR反应的特异性决定因素为: ①引物与模板DNA特异正确的结合; ②碱基配对原则; ③Taq DNA聚合酶合成反应的忠实性; ④靶基因的特异性与保守性。 其中引物与模板的正确结合是关键。引物与模板的结合及引物链的延伸是遵循碱基配对原则的。聚合酶合成反应的忠实性及Taq DNA聚合酶耐高温性,使反应中模板与引物的结合(复性)可以在较高的温度下进行,结合的特异性大大增加,被扩增的靶基因片段也就能保持很高的正确度。再通过选择特异性和保守性高的靶基因区,其特异性程度就更高。 (2) 灵敏度高 PCR产物的生成量是以指数方式增加的,能将皮克(pg=10-12g)量级的起始待测模板扩增到微克(ug=10-6g)水平。能从100万个细胞中检出一个靶细胞;在病毒的检测中,PCR的灵敏度可达3个RFU(空斑形成单位);在细菌学中zui小检出率为3个细菌。 (3) 简便、快速 PCR反应用耐高温的Taq DNA聚合酶,一次性地将反应液加好后,即在DNA扩增液和水浴锅上进行变性-退火-延伸反应,一般在2~4 小时完成扩增反应。扩增产物一般用电泳分析,不一定要用同位素,无放射性污染、易推广。 (4) 对标本的纯度要求低 不需要分离病毒或细菌及培养细胞,DNA 粗制品及总RNA均可作为扩增模板。可直接用临床标本如血液、体腔液、洗嗽液、毛发、细胞、活PCR技术概论。 重组人α-干扰素(人类淋巴母细胞N1)Antibody against Vibrio cholerae O1-Ogawa人乳腺腺癌细胞 重组的人干扰素Ω蛋白,磷酸盐等Vial shaker (IKA Vibrax 300 rpm)人乳腺管癌细胞 重组人干扰素γVIBRIO人乳腺癌细胞 重组高血压蛋白原酶Anti-FMDV 3B人乳腺管癌细胞 抗人埃博拉抗体Anti-FMDV P1 (TypeO,A,Asia1)人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞 BK病毒DNAAnti-FMDV VP1(Type o)人乳腺癌细胞 抗人CD4鼠单抗(FITC标记)(欧洲CE标准认证的产品)Clostridium botulinum DToxoidMonoclonal Antibody人乳腺癌细胞 重组血浆纤维蛋白原Dengue?NS1?Monoclonal Antibody人乳腺癌细胞 重组血液凝血因子II, VII, IX, X 蛋白EDENV1人乳腺癌细胞 人类疱疹病毒2型核酸扩增试剂EDENV2人乳腺腺癌细胞 重组抗凝血酶蛋白EDENV3人乳腺导管癌 抗乙肝核心抗原质控试剂EDENV4人子宫颈癌 重组人干扰素β抗原NS1人宫颈癌细胞 外周血单核细胞检定参照物Candida albicans Bgl2人宫颈癌细胞 百日咳疫苗效力生物检定参照物Candida albicans?Enolase人子宫颈表皮癌细胞 费城染色体移位基因参考盘(实时荧光定量PCR)Candida albicans Hsp70人子宫颈表皮癌细胞 猪高致病性蓝耳病毒RT-PCR检测试剂盒Cy5.55mg ADRA1BATXN3L小鼠白介素21(IL21)免疫试剂盒 Bcl2 alphaASTE1小鼠白介素2(IL2)免疫试剂盒 BAT5phosphoAPG4B(Ser309)小鼠白介素1受体相关激酶1(IRAK1)免疫试剂盒 BTBD1AFAP小鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra/CD121)免疫试剂盒 BCL7BADORA1小鼠白介素1可溶性受体Ⅱ(IL1sRⅡ)免疫试剂盒 BNC2ARSB小鼠白介素1可溶性受体Ⅰ(IL1sRⅠ)免疫试剂盒 BCL7CABAT小鼠白介素1β前体(proIL1B)免疫试剂盒 BSCL2A2BP1小鼠白介素1β(IL1β)免疫试剂盒
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