组蛋白提取试剂盒

Total Histone Extraction Kit

产品货号：12010

产品规格：50次/100次

产品简介：

本组蛋白提取试剂盒是由一套完整的优化buffer和试剂组成，用于从哺乳动物细胞或组织中提取总组蛋白（H2A、H2B、H3和H4），整个流程可在80min内完成，且可保持组蛋白提取物中的翻译后修饰（PTM）完整性，因此提取物可用于各种翻译后修饰检测及应用，包括组蛋白甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化、SUMO化和ADP-核糖基化作用研究。

包装清单：

产品特点：

1.所提取组蛋白可保留所有相关翻译后修饰，包括甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化、SUMO化、ADP-核糖基化以及Neddylation等。

2.建议每次从10⁸个细胞/0.1g组织中提取组蛋白样品。

3.整个实验流程约需80min。

4.无需超速离心。

操作步骤：

A：组织中提取

1.收集0.1g组织，加入1.0ml Lysis Buffer 1及适量蛋白酶抑制剂（依据实验选择），冰上用组织研磨器或匀浆管研磨。

2.将匀浆后样品转移至1.5ml 离心管中，11000rpm 5min，吸弃上清保留沉淀。

3.至步骤2。

B：细胞中提取

1.收集约10⁸个细胞，3000rpm 5min（悬浮细胞直接离心，贴壁细胞使用细胞刮刀或胰蛋白酶消化离心收集均可。注意用预冷PBS清洗残留培养基和胰蛋白酶等），吸弃上清。

2.至步骤1。

步骤1：加1.0ml Lysis Buffer 1及适量蛋白酶抑制剂（依据实验选择），冰上孵育30min（每10min用移液枪吹打一次），4°C 11000rpm离心5min，弃上清。

步骤2：于上述步骤离心管中加入200μl Lysis Buffer 2，置于冰上30min（每10min涡旋一次），4°C 11000rpm离心5min，吸取上清于一新离心管中。

步骤3：加入40μl Balance Buffer于上述步骤离心管中，用移液枪轻轻吹匀。

步骤4：使用BCA定量试剂盒定量。

步骤5：于步骤3离心管中加入2.4μl Adjust Buffer，轻轻吹匀，并应用于下游研究。